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人直腸平滑肌細(xì)胞

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更新時間:2024-10-31 12:32:52瀏覽次數(shù):221

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7193 主要用途 僅供科研研究實驗
人直腸平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:急性淋巴細(xì)胞性白血病1抗體 四分子交聯(lián)體5抗體 組織相容性復(fù)合物RTF1抗體 人子宮頸上皮細(xì)胞 人食管癌組織源細(xì)胞 PK-8人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞 HEL (人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

人直腸平滑肌細(xì)胞

人直腸平滑肌細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

直腸組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7193

細(xì)胞簡介:

人直腸平滑肌分離自直腸組織,;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內(nèi),。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸,,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,,下端以而終,。直腸上端的大小似結(jié)腸,其下端擴(kuò)大成直腸壺腹,,是糞便排出前的暫存部位,,最下端變細(xì)接。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,,與骶椎有相同的曲度,。直腸周圍多脂肪、無縱帶,,位于膀胱和生殖器官的背側(cè),。直腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈,來自髂內(nèi)動脈的直腸中動脈和來自髂內(nèi)動脈的直腸下動脈,。平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式,;腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚,。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生,,這進(jìn)一步證明了炎癥時的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性,。利用腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng),可以幫助了解收縮,、增殖和胃腸道結(jié)締組織對平滑肌細(xì)胞的反應(yīng),。

方法簡介:

公司實驗室分離的人直腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的人直腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%CO2,,5%

人直腸平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

人直腸平滑肌細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠鳥酸脫羧酶   英文名稱:   Mouse Ornithine Decarboxylase   規(guī)格:      英文縮寫:   ODC

小鼠卵清蛋白特異性IgE   英文名稱:   Mouse ovalbumin specific Immunoglobulin E   規(guī)格:      英文縮寫:   OVA sIgE

小鼠氧化低密度脂蛋白   英文名稱:   Mouse oxidized Low Density Lipoprotein   規(guī)格:      英文縮寫:   oxLDL

小鼠骨保護(hù)素   英文名稱:   Osteoprotegerin   規(guī)格:      英文縮寫:   OPG

小鼠絨毛膜(CG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human enkephalin (ENK) ELISA Kit 人腦啡肽(ENK)試劑盒

HumanVacuolatingcytotoxinA,VacAELISAKit 人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

guineapigImmunoglobulinE,IgE試劑盒豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性超敏熒光定量試劑盒20

Mousecardiacoponin,cTn-ELISAKit小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)試劑盒規(guī)格:96T/48T

DYDC2蛋白抗體

宮頸癌抑制蛋白4抗體

IL6ST重組小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 Protein

alpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原 0.5mgalpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原

C1D重組人 C1D 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CPLX2 Protein Human 重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白

BST1 Protein Rat 重組大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白 Recombinant Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)

CPLX2 Protein Human 重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白

IgG2a重組小鼠 IgG2a-Fc 蛋白 Protein

CD59 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白

AKR1C2重組人 AKR1C2 蛋白 Protein

人直腸平滑肌細(xì)胞大鼠平足蛋白(PDPN)試劑盒 ,英文名: PDPN ELISA Kit

Mouse thrombomodulin (TM) ELISA Kit 小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒

RatSubstanceP,SPELISAKit 大鼠P物質(zhì)(SP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGP-BB(HumanGlycogenphosphorylaseBB)ELISAKit人糖原0酸化酶同工酶BB

細(xì)胞調(diào)亡DNA條帶試劑盒10

Ratthyroxine,T4ELISAKit大鼠甲狀腺素(T4)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗;

  4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。


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