詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
直腸癌組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7470 |
細胞簡介:
人直腸癌組織源分離自癌組織,;癌(cancer)是指起源于上皮組織的惡性腫瘤,,是惡性腫瘤中最常見的一類。相對應(yīng)的,,起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤,。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名,如腎母細胞瘤,、惡性畸胎瘤等,。一般人們所說的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細胞分化和增殖異常,、生長失去控制,、浸潤性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征,其發(fā)生是一個多因子,、多步驟的復(fù)雜過程,,分為致癌、促癌,、演進三個過程,,與吸煙、感染,、職業(yè)暴露,、環(huán)境污染、不合理膳食,、遺傳因素密切相關(guān),。癌細胞,是一種變異的細胞,,是產(chǎn)生癌癥的病源,。癌細胞與正常細胞不同,有無限增殖,、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點,,能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織。癌細胞除了分裂失控外(能進行多極分裂),,還會局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分,。分惡性和良性兩種。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化,、經(jīng)Percoll離心純化制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人直腸癌組織源經(jīng)檢測,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human calf iestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 人牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒
HumanHydroxyproline-RichGlycoprotein,HRGPELISAKit 人羥脯糖蛋白(HRGP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human26Sproteasome,26SPSM試劑盒人26S蛋白酶體(26SPSM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母纖維素酶(cellulase)活性熒光定量試劑盒20次
Mouseapelin12,AP12ELISAKit小鼠apelin12(AP12)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶相關(guān)蛋白1抗體
干細胞生長因子SCGF抗體
FGFR1重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
Mast Cell Chymase 肥大細胞類1 0.5mgMast Cell Chymase 肥大細胞類1
CALML5重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白
ENPEP Protein Mouse 重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白
Mast Cell Chymase 肥大細胞類1 0.5mgMast Cell Chymase 肥大細胞類1
CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白
FGFR1重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ENPEP Protein Mouse 重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白
CALML5重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
人直腸癌組織源細胞大鼠葡萄糖60酸脫氫酶(G6PD)試劑盒 ,,英文名: G6PD ELISA Kit
Mouse serum amyloid A (SAA) ELISA Kit 小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒
Ratai-IgEreceptoraibodyELISAKit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGP-IIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II
細胞低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑盒規(guī)格:96T/48T