詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
支氣管組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7065 |
細(xì)胞簡介:
人支氣管成纖維分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),,是指由氣管分出的各級分枝,,由氣管分出的一級支氣管,即左,、右主支氣管,。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長,,走向傾斜,;后者較粗短,走向較前者略直,,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管,。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,,而支氣管不是,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。支氣管成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人支氣管成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人支氣管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠酸性0酸酶試劑盒 小鼠酸性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠酸性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠酸性0酸酶試劑盒、小鼠酸性0酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒,、小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原N末端肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠酶2(CA-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat activated protein C (APC) ELISA Kit 大鼠活化蛋白C(APC)試劑盒
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit 人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Cobravenomfactor,CVF試劑盒毒蛇因子(CVF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseendotoxin,ETELISAKit小鼠內(nèi)毒素(ET)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CGG結(jié)合蛋白1抗體
甘-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體
FGF12重組狗 FGF12 蛋白 Protein
Nurr1 核受體相關(guān)因子-1(抗原 0.5mgNurr1 核受體相關(guān)因子-1(抗原)
PRKD2重組人 PRKD2 / PKD2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白
Nurr1 核受體相關(guān)因子-1(抗原 0.5mgNurr1 核受體相關(guān)因子-1(抗原)
CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
FGF12重組狗 FGF12 蛋白 Protein
OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白
PRKD2重組人 PRKD2 / PKD2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
人支氣管成纖維細(xì)胞大鼠前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素1(PCSK1)試劑盒 ,英文名: PCSK1 ELISA Kit
Mouse von Willebrand factor / ristocetin cofactor (vWF) ELISA Kit 小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)試劑盒
Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISAKit 大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGR-AlphaELISAKit大鼠糖皮質(zhì)激素受體α
細(xì)胞蛋酸酶1(PP1)活性比色法定量試劑盒20次
RatTotalbileacide,TBAELISAKit大鼠總膽汁酸(TBA)試劑盒規(guī)格:96T/48T