人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：Kelch樣蛋白17抗體 成纖維細(xì)胞生長因子11抗體 RSF1蛋白抗體 人直腸平滑肌細(xì)胞 人輸尿管平滑肌細(xì)胞 Ramos人伯基特淋巴瘤細(xì)胞 SW1116 (人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：皮膚組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細(xì)胞簡介：

人真皮微血管內(nèi)皮分離自真皮組織；真皮,，位于表皮深層,，向下與皮下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,，埋于基質(zhì)內(nèi),。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性,，又有韌性,。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白,、彈性纖維以及基質(zhì),。微血管內(nèi)皮細(xì)胞（MEC）在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長,、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用,。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域，由于表皮細(xì)胞,、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟,，人們對這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。與之相比,，對參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細(xì)胞——真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞,，則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。

方法簡介：

公司實驗室分離的人真皮微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、最后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人真皮微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。

收到細(xì)胞如何處理,？

1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。

4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子甲狀腺素(T4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat lactoferrin / lactoferrin (LF/LTF) ELISA Kit 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒

HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit 人骨成型蛋白7(BMP-7)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancardiacisoformofopni,c試劑盒人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒10次

HumanSolubleClusterofdiffereiation30ligand，sCD30LELISAKit人可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD72蛋白抗體

鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白3抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白3）

HA重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

PTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor 0.5mgPTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor ) 蛋白酪0酸酶-1B(抗原)

ADH7重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

GKN1 Protein Human 重組人 GKN1 / Gastrokine 1 蛋白

ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

PTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor 0.5mgPTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor ) 蛋白酪0酸酶-1B(抗原)

GKN1 Protein Human 重組人 GKN1 / Gastrokine 1 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ADH7重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠前動力蛋白受體1(PKR1)試劑盒 ,，英文名： PKR1 ELISA Kit

Mouse bradykinin (BK) ELISA Kit 小鼠血管舒緩激肽(BK)試劑盒

Ratheatshockprotein40,hSP-40ELISAKit 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGR-BetaELISAKit大鼠糖皮質(zhì)激素受體β

細(xì)胞單胺氧化酶B型(MAO-B)活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次

Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T