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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人真皮淋巴上皮細(xì)胞
組織來源:皮膚組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
人真皮淋巴上皮分離自真皮組織,;真皮,,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,,埋于基質(zhì)內(nèi),。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,,又有韌性,。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白,、彈性纖維以及基質(zhì),。微血管內(nèi)皮細(xì)胞(MEC)在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長,、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用,。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域,由于表皮細(xì)胞,、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟,,人們對這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。
方法簡介:
公司實驗室分離的人真皮淋巴上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人真皮淋巴上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat dehydroepiandrosterone (DHEA) ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮(DHEA)試劑盒
HumanProgesterone,PROGELISAkit 人孕激素/孕酮(PROG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCollageypeⅡ,ColⅡ試劑盒人Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量試劑盒20次
HumaeceptorⅠfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅠELISAKitGFc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CD318抗體
鈣激活鉀通道蛋白β4抗體
REG1A重組食蟹猴 REG1A / PSPS 蛋白 Protein
lamin A 核纖層蛋白A抗原 0.5mglamin A 核纖層蛋白A抗原
SELL重組人 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein
HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白
IgG2b Protein Mouse 重組小鼠 IgG2b-Fc 蛋白
白介素17(IL17)重組蛋白 Recombinant Interleukin 17 (IL17)
HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白
BCL2L1重組小鼠 BCL2L1 / Bcl-XL 蛋白 (aa 1-212, His 標(biāo)簽) Protein
PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GOT1重組人 GOT1 / Aspartate aminotransferase 蛋白 Protein
人真皮淋巴上皮細(xì)胞大鼠前列腺素E合酶2(PTGES2)試劑盒 ,,英文名: PTGES2 ELISA Kit
Mouse angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)試劑盒
Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISAKit 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGR-Beta(Humanglucocoicoidreceptor-Beta)ELISAKit人糖皮質(zhì)激素受體β
細(xì)胞單胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量試劑盒20次
RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作