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產(chǎn)品名稱：人牙齦成纖維細(xì)胞

組織來源：牙齦組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次；

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人牙齦成纖維分離自牙齦組織,；牙齦指緊貼于牙頸周圍及鄰近的牙槽骨上淡紅色的結(jié)構(gòu),，由復(fù)層扁平上皮及固有層組成。是口腔黏膜的一部分,，血管豐富,，呈淡紅色，堅(jiān)韌而有彈性,，因缺乏黏膜下層,，直接與骨膜緊密相連，故牙齦不能移動(dòng),。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻,，散在生長(zhǎng),，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng),，平坦,、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形，顏色淡,。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人牙齦成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人牙齦成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

兔粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rabbit GM-CSF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(rabbit HGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔透明質(zhì)酸(rabbit HA)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔心脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit H-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠NOD樣受體-1(NOD-1)試劑盒 96T/48T

Rat hyaluronic acid binding protein (HABP) ELISA Kit 大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)試劑盒

HumahyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 人促甲狀腺素(TSH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCollageypeⅠ,ColⅠ試劑盒人Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性間接比色法定量試劑盒20次

Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit人重組激活基因1(RAG-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

AF680標(biāo)記的腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPK α 1抗體

多配體聚糖4抗體

ERBB3重組小鼠 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein

P選擇素(SELP)重組蛋白 Recombinant Selectin, Platelet (SELP)

APCS重組人 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白

ALCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD166 / ALCAM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

骨成型蛋白4(BMP4)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白

GAD2重組小鼠 GAD65 / GAD2 蛋白 Protein

TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

人牙齦成纖維細(xì)胞大鼠肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)試劑盒 ,，英文名： CPT1A ELISA Kit

Mouse angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒

RatAquaporin2,AQP-2ELISAKit 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGzms-A(HumangranzymesA)ELISAKit人顆粒酶A

細(xì)胞長(zhǎng)鏈同脂酰硫解酶(KETOACYLCOATHIOLASE)活性比色法定量試劑盒20次

RatUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit大鼠高敏三甲狀腺原(u-T3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作