詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
心臟組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7593 |
細(xì)胞簡介:
人心臟纖維原分離自心臟組織;心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成,,非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%,,其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。纖維細(xì)胞是機(jī)能不活躍的成纖維細(xì)胞,。胞體呈梭形,,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,,胞核小,,染色深。電鏡下可見,,細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達(dá),。當(dāng)組織受損時,纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞而參與修復(fù)過程。纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細(xì)胞,,如在組織損傷后的修復(fù)過程中,,纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細(xì)胞。纖維細(xì)胞較小,,呈多角形,,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,,胞核亦較小,,染色較深,電鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少,,高爾基復(fù)合體不發(fā)達(dá),。成纖維細(xì)胞較大,呈星形或梭形,,有突起,,細(xì)胞核呈卵圓形,染色質(zhì)稀疏,,染色淡,核仁明顯,,胞質(zhì)較多,。成纖維細(xì)胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,,形成膠原纖維,、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成,,當(dāng)心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子,。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中最常見的細(xì)胞,可合成和分泌膠原纖維,、彈性纖維,、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,,部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞,,其功能活動也得以恢復(fù),參與組織損傷后的修復(fù),。因此,,對心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點(diǎn)。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人心臟纖維原采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人心臟纖維原經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human rotavirus aigen (RV Ag) ELISA Kit 人輪狀病毒抗原(RV Ag)試劑盒
HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit 人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Duckcarbonicanhydrase,CA試劑盒鴨子酶(CA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡試劑盒(針對二甲基,、基)10/20次
MouseDopamineD1receptor,D1RELISAKit小鼠多巴胺D1受體(D1R)試劑盒規(guī)格:96T/48T
9號染色體開放閱讀框72抗體
電壓門控鈉離子通道型α4抗體
IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原
MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原
CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
人心臟纖維原細(xì)胞大鼠乳酸脫氫酶B(LDHB)試劑盒 ,英文名: LDHB ELISA Kit
Mouse vasoactive iestinal peptide (VIP) ELISA Kit 小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit 大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGzms-B(MousegranzymesB)ELISAKit小鼠顆粒酶B
細(xì)胞二(MDA)比色法定量試劑盒50次
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。