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產(chǎn)品名稱：人胃黏膜上皮細胞

組織來源：胃組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細胞簡介：

人胃黏膜上皮分離自胃黏膜組織；胃黏膜柔軟,，活體呈橘紅色,。胃空虛時形成許多皺襞，充盈時變平坦,。幽門處的黏膜形成環(huán)形皺襞,，突向腔內(nèi)稱幽門瓣。胃黏膜可分為三層,，即上皮層（單層柱狀上皮）,、固有層（由結(jié)締組織構(gòu)成,、含有大量的胃腺）和黏膜肌層（為薄層平滑肌,、排列成內(nèi)環(huán)外縱）。胃黏膜上皮細胞源自胃黏膜的上皮層,，細胞為單層柱狀上皮,，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面,，防止胃酸和對胃黏膜的損害,。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細胞為研究細胞功能及致病因子、藥物,、激素對細胞的損傷,、保護和功能調(diào)控提供了簡單而的模型。

方法簡介：

公司實驗室分離的人胃黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人胃黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。

二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）,、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
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小鼠白介素7(IL-7)ELISA 試劑盒 96T/48T

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干細胞熒光定性試劑盒20次

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17號染色體開放閱讀框77抗體

核糖基轉(zhuǎn)移酶1單克隆抗體

IGFBP3重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 Protein

Melamine/OVA(ovalbumin 5mgMelamine/OVA(ovalbumin) 三聚胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物

AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

GCSH Protein Human 重組人 GCSH 蛋白

CD24 Protein Mouse 重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 標簽)

Melamine/OVA(ovalbumin 5mgMelamine/OVA(ovalbumin) 三聚胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物

GCSH Protein Human 重組人 GCSH 蛋白

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人胃黏膜上皮細胞大鼠神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)試劑盒 ,，英文名： NCAN ELISA Kit

Mouse cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒

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CLIAKitforHB-Beta(HumanBeta-subunitsofhemoglobin)ELISAKit人血紅蛋白β亞基

細胞半胱蛋白酶-4(CASPASE-4)活性熒光定量試劑盒20次

RatVitaminC,VCELISAKit大鼠C(VC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細胞如何處理,？

1,、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

3、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。

5,、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時，若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作