詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胃癌組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7476 |
細胞簡介:
人胃癌組織源成纖維分離自胃癌組織;胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤,,在我國各種惡性腫瘤中發(fā)病率居,胃癌發(fā)病有明顯的地域性差別,,在我國的西北與東部沿海地區(qū)胃癌發(fā)病率比南方地區(qū)明顯為高,。好發(fā)年齡在50歲以上,男女發(fā)病率之比為2:1,。由于飲食結(jié)構(gòu)的改變,、工作壓力增大以及幽門螺桿菌的感染等原因,使得胃癌呈現(xiàn)年輕化傾向,。胃癌可發(fā)生于胃的任何部位,,其中半數(shù)以上發(fā)生于胃竇部,胃大彎,、胃小彎及前后壁均可受累,。絕大多數(shù)胃癌屬于腺癌,早期無明顯癥狀,,或出現(xiàn)上腹不適,、噯氣等非特異性癥狀,常與胃炎,、胃潰瘍等胃慢性疾病癥狀相似,,易被忽略,因此,,目前我國胃癌的早期診斷率仍較低,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團,;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,,細胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
方法簡介:
公司實驗室分離的人胃癌組織源成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人胃癌組織源成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠金屬硫蛋白(MT)試劑盒 96T/48T
小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 96T/48T
小鼠解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)試劑盒 96T/48T
小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒 96T/48T
小鼠流行性出血熱抗體(EHF-Ab)試劑盒 96T/48T
Rat keratinocyte aocrine factor (KAF) ELISA Kit / amphiregulin (AR) ELISA Kit 大鼠角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)試劑盒/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒
Humaenascin-R,TN-RELISAKit 人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanActivinA,ACV-A試劑盒人活化素A(ACV-A)試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂質(zhì)過氧化物(linoleicacid)ELISA定量測定試劑盒48/96次
MouseAndrostenedione,ASDELISAKit小鼠雄烯二同(ASD)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織蛋白酶H重連抗體
超氧化物歧化酶1(銅/鋅過氧化物歧化酶SOD抗體
ACVR1重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 Protein
NRF-1(nuclear respiratory factor-1 0.5mgNRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原
NTRK1重組人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 285-413, His 標簽) Protein
CXCL14 Protein Human 重組人 CXCL14 / BRAK 蛋白
IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白
NRF-1(nuclear respiratory factor-1 0.5mgNRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原
CXCL14 Protein Human 重組人 CXCL14 / BRAK 蛋白
ACVR1重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 Protein
IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白
NTRK1重組人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 285-413, His 標簽) Protein
人胃癌組織源成纖維細胞大鼠神經(jīng)疾病靶標酯酶(E)試劑盒 ,,英文名: E ELISA Kit
Mouse plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒
RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISAKit 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHbC(HumanHemoglobinC)ELISAKit人血紅蛋白C
細胞半胱蛋白酶-3(CASPASE-3)活性熒光定量試劑盒20次
RatVitaminD2,VD2ELISAKit大鼠2(VD2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。