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人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

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更新時間:2024-10-30 13:38:32瀏覽次數(shù):208

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7542 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品:KIAA1310蛋白抗體 STAC2蛋白抗體 環(huán)指蛋白23抗體 人小腸黏膜上皮細(xì)胞 人牙齦成纖維細(xì)胞 sNF96.2人1型神經(jīng)纖維瘤細(xì)胞 NCI-H209 [H209] (人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

外周血

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

樹突狀

YS-01X7542

細(xì)胞簡介:

人外周血DC分離自外周血,,由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的,;外周血是除骨髓之外的血液,,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。DC細(xì)胞,,全稱樹突狀細(xì)胞(DC),,是近年來倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞(APC),能攝取,、加工及呈遞抗原,,啟動T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng),。由美國學(xué)者Steinman1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn),從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞,,因其細(xì)胞膜向外伸出,形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起,,故而命名為樹突狀細(xì)胞,。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,,處于啟動,、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié),。

方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞,、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 半貼半懸浮

細(xì)胞形態(tài) 樹突狀

傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞,;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)


公司正在出售的產(chǎn)品:

豚鼠端粒酶試劑盒   豚鼠端粒酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠端粒酶試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠端粒酶試劑盒,、豚鼠端粒酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月,。

豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒   豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒、豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月,。

豚鼠促卵泡素試劑盒   豚鼠促卵泡素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠促卵泡素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠促卵泡素試劑盒、豚鼠促卵泡素eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月,。

豚鼠表皮生長因子試劑盒   豚鼠表皮生長因子試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠表皮生長因子試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠表皮生長因子試劑盒,、豚鼠表皮生長因子eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA 試劑盒

Human glycated albumin (GA) ELISA Kit 人糖化白蛋白(GA)試劑盒

HumanHomocysteicacid,HcyELISAKit 人同型半胱(Hcy)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanBence-Jonesprotein,BJP試劑盒人本周蛋白(BJP)試劑盒

植物種子活性葉綠體分離試劑盒20

Humaarate-resistaacidphosphatase5b,,ACP-5bELISAKit人抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒

自然殺傷凝集素樣受體G2抗體

表皮生長因子受體III型突變體抗體

CA9重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ATF1 (Activating Transcription Factor1 0.5mgATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化復(fù)制因子1

CCL24重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FLT1 Protein Human 重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD302 Protein Rat 重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白

ATF1 (Activating Transcription Factor1 0.5mgATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化復(fù)制因子1

FLT1 Protein Human 重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CA9重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD302 Protein Rat 重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白

CCL24重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)大鼠神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(P1)試劑盒 ,,英文名: P1 ELISA Kit

Mouse cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)試劑盒

Rat25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit 大鼠25D3(25(OH)D3/25HVD3)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHBeAg(立可讀)乙型肝e抗原

細(xì)胞半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20

Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit大鼠絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。


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