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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
血液組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7627 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人外周血淋巴分離自外周血,；外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,，在二十一世紀(jì)初人類開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念,。淋巴細(xì)胞（lymphocyte）是白細(xì)胞的一種，是體積最小的白細(xì)胞,。其由淋巴器官產(chǎn)生,，主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中,，是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分,，是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者,，是對(duì)抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵"。淋巴細(xì)胞是一類具有免疫識(shí)別功能的細(xì)胞系,，按其發(fā)生遷移,、表面分子和功能的不同,，可分為T淋巴細(xì)胞（又名T細(xì)胞）、B淋巴細(xì)胞（又名B細(xì)胞）和自然殺傷（NK）細(xì)胞,。T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞,，它們的最初來(lái)源是相同的，都來(lái)自造血組織,。T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺,，在胸腺激素等的作用下成熟，而B細(xì)胞在骨髓中分化成熟,。當(dāng)受抗原刺激后,，T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，再分化為致敏T淋巴細(xì)胞,，參與細(xì)胞免疫,，其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等,；而B淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞,，再分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白（抗體）,，參與體液免疫,，其功能是產(chǎn)生抗體，提呈抗原,，以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié),；NK細(xì)胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng)，具有殺傷靶細(xì)胞的作用,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血淋巴采用取外周血,、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血淋巴經(jīng)過(guò)檢測(cè),，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠白三烯D4(LTD4)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒
Rat osteoclast differeiation factor (ODF) ELISA Kit 大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)試劑盒
Humanai-phospholipidaibody,Apl/APAELISAKit 人抗0脂抗體(Apl/APA)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanbetacellulin,BTC試劑盒人β細(xì)胞素(BTC)試劑盒
植物種子甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒3次
Humaargetedribonuclease,ELISAKit人靶向核糖核酸酶()試劑盒
轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白2抗體
胞吞調(diào)控蛋白Eps15抗體
PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein
信號(hào)素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)
VMO1重組人 VMO1 蛋白 Protein
FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
信號(hào)素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)
FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
VMO1重組人 VMO1 蛋白 Protein
人外周血淋巴細(xì)胞大鼠神經(jīng)型合酶(NOS1)試劑盒 ,，英文名： NOS1 ELISA Kit
Mouse cyclin D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)試劑盒
RatVitaminC,VCELISAKit 大鼠C(VC)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHB-EGF(Humanheparin-bindingepidermalgrowthfactor-likegrowthfactor)ELISAKit人肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子
細(xì)胞半胱(cysteine)含量比色法定量試劑盒20次
Ricinuscommunisagglinin,RCAELISAKit蓖麻凝集素(RCA)試劑盒
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