化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
尿道組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7246 |
細胞簡介：
人輸尿管上皮分離自輸尿管組織,；輸尿管上接腎盂，下連膀胱,，是一對細長的管道,，呈扁圓柱狀，位于腹膜后,，為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),，沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進入骨盆,。輸尿管有三個狹窄部：一個在腎盂與輸尿管移行處（輸尿管起始處）；一個在越過小骨盆入口處,；最后一個在進入膀胱壁的內(nèi)部,。這些狹窄是結(jié)石、及壞死組織容易停留的部位,。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu),，即瓦耳代爾鞘，它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管,。臨床上將輸尿管分為上,、中、下三段,，也可稱為腹段,、盆段、膀胱段,。其中,，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動脈處,；盆段,，自髂動脈到膀胱壁；膀胱段,，自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜,、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層,，黏膜層,、固有層、肌層,、外膜,。黏膜層表面為移行上皮，約有4-5層細胞,；固有層由細密的結(jié)締組織構(gòu)成,，內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維；輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成,；外膜為疏松結(jié)締組織,，營養(yǎng)血管由外膜進入輸尿管。其中,，輸尿管上皮細胞主要分布于黏膜層,。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗,；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介：
公司實驗室分離的人輸尿管上皮采用先消化,、然后機械分離法使輸尿管分層、最后膠原酶消化,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人輸尿管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin） 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠Flt3(mouse Flt3) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)試劑盒
Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Deererythrocytemembraneprotein,EMP試劑盒紅細胞膜蛋白(EMP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞脘蛋白(PRION)蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
腫瘤/睪丸抗原65抗體
X染色體開放閱讀框21抗體
EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein
降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)
CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein
CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白
MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白
降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)
CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白
EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein
MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白
CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein
人輸尿管上皮細胞大鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因γ(GROγ)試劑盒 ,，英文名： GROγ ELISA Kit
Mouse vitamin E (VE) ELISA Kit 小鼠(VE)試劑盒
RatHistamine,HISELISAKit 大鼠組胺(HIS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHDELISAKit大鼠組織蛋白去乙酰化酶
細胞VEGFR1(FLT-1)激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitα-BGTα-銀環(huán)蛇毒素
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