詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
尿道組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7246 |
細(xì)胞簡介:
人輸尿管上皮分離自輸尿管組織,;輸尿管上接腎盂,,下連膀胱,是一對細(xì)長的管道,,呈扁圓柱狀,,位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),,沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進(jìn)入骨盆,。輸尿管有三個狹窄部:一個在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處),;一個在越過小骨盆入口處;最后一個在進(jìn)入膀胱壁的內(nèi)部,。這些狹窄是結(jié)石,、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu),,即瓦耳代爾鞘,,它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上,、中,、下三段,也可稱為腹段,、盆段,、膀胱段。其中,,腹段自腎盂輸尿管交界處,,到跨越髂動脈處;盆段,,自髂動脈到膀胱壁;膀胱段,,自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜,、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層,,黏膜層,、固有層、肌層,、外膜,。黏膜層表面為移行上皮,約有4-5層細(xì)胞,;固有層由細(xì)密的結(jié)締組織構(gòu)成,,內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維;輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成,;外膜為疏松結(jié)締組織,,營養(yǎng)血管由外膜進(jìn)入輸尿管。其中,,輸尿管上皮細(xì)胞主要分布于黏膜層,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人輸尿管上皮采用先消化,、然后機(jī)械分離法使輸尿管分層,、最后膠原酶消化,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人輸尿管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠Fibronectin(mouse Fibronectin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠Flt3(mouse Flt3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)試劑盒
Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Deererythrocytemembraneprotein,EMP試劑盒紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞脘蛋白(PRION)蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
腫瘤/睪丸抗原65抗體
X染色體開放閱讀框21抗體
EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein
降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)
CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein
CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白
MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白
降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)
CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白
EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein
MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白
CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein
人輸尿管上皮細(xì)胞大鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因γ(GROγ)試劑盒 ,,英文名: GROγ ELISA Kit
Mouse vitamin E (VE) ELISA Kit 小鼠(VE)試劑盒
RatHistamine,HISELISAKit 大鼠組胺(HIS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHDELISAKit大鼠組織蛋白去乙?;?/span>
細(xì)胞VEGFR1(FLT-1)激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitα-BGTα-銀環(huán)蛇毒素