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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源：視網(wǎng)膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮分離自視網(wǎng)膜組織,；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成,，兩層間在病理情況下可分開(kāi)，稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用,。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層,、視錐,、視桿細(xì)胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層,、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用,；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層,，專司感光,，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,，而視錐細(xì)胞則在中心凹處最多,。層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用,。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專管傳導(dǎo),。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū),，其分辨能力。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力,、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義,。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細(xì)胞具有不同的特性,，在腦和視網(wǎng)膜中，這些內(nèi)皮細(xì)胞具有內(nèi)屏障的功能,，在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài),，釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用，體外分離培養(yǎng)RCEC對(duì)研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機(jī)制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、最后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat oponin I (Tn- I) ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒
HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 人0酯酶C(PLC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
DeerSerumamyloidA,SAA試劑盒血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEndotheliallipase,ELELISAKit小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物肌動(dòng)蛋白（內(nèi)參）單克隆抗體
TWIST蛋白抗體
HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PEPT2 (Peptide-transporters 2 0.5mgPEPT2 (Peptide-transporters 2) 腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗原
STIM1重組人 STIM1 / GOK 蛋白 Protein
CIRBP Protein Human 重組人 CIRBP / Cold-inducible RNA-binding 蛋白
CD40 Protein Human 重組人 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
PEPT2 (Peptide-transporters 2 0.5mgPEPT2 (Peptide-transporters 2) 腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗原
CIRBP Protein Human 重組人 CIRBP / Cold-inducible RNA-binding 蛋白
HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
CD40 Protein Human 重組人 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
STIM1重組人 STIM1 / GOK 蛋白 Protein
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠食欲素A(OXA)試劑盒 ,，英文名： OXA ELISA Kit
Mouse vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 小鼠2(VD2)試劑盒
Rat5-Nucleotidase,5-ELISAKit 大鼠5核苷酸酶(5-)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHDL(HumanHighdensitylipoprotein)ELISAKit人高密度脂蛋白
細(xì)胞KB激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKiANKL倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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