化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7409 |
細胞簡介：
人視網(wǎng)膜色素上皮分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,，是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成,，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞,、遮光、散熱以及再生和修復等作用,。組織學上視網(wǎng)膜分為10層,，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐,、視桿細胞層,、外界膜、外顆粒層,、外叢狀層,、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細胞層,、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成,。神經(jīng)元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞,。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,，而視錐細胞則在中心凹處最多。層叫雙節(jié)細胞,，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,，專管傳導,。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū),，其分辨能力。視網(wǎng)膜色素上皮（RPE）位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間,，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡膜血管之間的離子,、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運通道,；主要是由單層色素上皮細胞所構(gòu)成,，排列十分規(guī)則。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán),，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性,，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內(nèi)皮細胞和光感受器細胞的結(jié)構(gòu)完整性,。細胞呈多角形,，細胞分為三部分，即頂部,、體部和基底部,。視網(wǎng)膜色素上皮細胞無再生能力，細胞死亡后不被替換,，而是鄰近的細胞向側(cè)面滑動,，以填補死亡細胞遺留下來的空間。視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間,，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡膜血管之間的離子,、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運通道,。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán),，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內(nèi)皮細胞和光感受器細胞的結(jié)構(gòu)完整性,。
方法簡介：
公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜色素上皮經(jīng)S-100免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
血小板活化因子 (PAF) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T
血小板衍化生長因子 -AA(PDGF-AA) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
血小板衍化生長因子 -AB(PDGF-AB) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
血小板衍化生長因子 -BB(PDGF-BB) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai hepatitis B virus e aibody (HBeAb) ELISA Kit 人抗乙型肝病毒e抗體(HBeAb)試劑盒
HumanexteinELISAKit 人外顯肽(extein)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforABAb(Humanai-braiissueaibody)ELISAKit人抗腦組織抗體
(0.05%)乙四乙酸混合液100毫升
Mouseneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit小鼠中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)試劑盒規(guī)格：96T/48T
脂肪酸合成酶抗體
TRIM16蛋白抗體
NA重組甲型流感 H5N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
Ractopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍蛋白偶聯(lián)物 1mgRactopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍蛋白偶聯(lián)物
GFRA2重組人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 Protein
CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
Ractopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍蛋白偶聯(lián)物 1mgRactopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍蛋白偶聯(lián)物
CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白
NA重組甲型流感 H5N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
GFRA2重組人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 Protein
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞大鼠釋放激素(GH)試劑盒 ，英文名： GH ELISA Kit
Porcine tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒
ELISA 小鼠腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子受體(mouse BDNF R) 進口分裝
CLIAKitforL-LDHELISAKit大鼠L-鼠乳酸脫氫酶
通用型EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitBF雞B因子
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
化工儀器網(wǎng)