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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞
組織來(lái)源:視網(wǎng)膜組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人視網(wǎng)膜Muller分離自視網(wǎng)膜組織,;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成,,兩層間在病理情況下可分開(kāi),,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,,由色素上皮細(xì)胞組成,,它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用,。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層,、視錐,、視桿細(xì)胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層,、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用,;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成,。神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專司感光,,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞,。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處最多,。層叫雙節(jié)細(xì)胞,,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用,。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),,它貼于眼球的后壁部,,傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,,在黃斑區(qū),其分辨能,。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細(xì)胞,,大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞的90%,因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來(lái)越多的關(guān)注,。在超微結(jié)構(gòu)水平上,,Muller細(xì)胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細(xì)胞更高的電子密度,更發(fā)達(dá)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),,細(xì)胞核是典型的卵圓形或多角形,。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細(xì)胞形態(tài)也會(huì)有所差異的,。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,,不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結(jié)構(gòu)和功能的作用,并調(diào)制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動(dòng),,還能參與多種病理過(guò)程,,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變,、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等,,體外培養(yǎng)Muller細(xì)胞是研究這些增殖性病變途徑之一。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人視網(wǎng)膜Muller采用膠原酶消化法和反復(fù)消化法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人視網(wǎng)膜Muller經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1 英文名稱: Ttansforming Growth Factor -β1 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): TGF-β1
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β2 英文名稱: Ttansforming Growth Factor -β2 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): TGF-β2
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1 英文名稱: Tissue inhibitors of metalloproteinases 1 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): TIMP-1
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2 英文名稱: Tissue inhibitors of metalloproteinases 2 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): TIMP-2
小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble adhesion molecule (Sam) ELISA Kit 人可溶性粘附分子(Sam)試劑盒
Humancadherln-relatedneuronalreceptor1,C-1ELISAKit 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(C-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor1,3-DPG(Human1,3-Disphosphoglycerate,ELISAKit人1,3-二0酸甘油酸
飲料比色法定量試劑盒20次
MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit小鼠腎損傷分子1(Kim-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
整合素樣金屬蛋白酶與1型-7( (N端)抗體
TIP30蛋白抗體
CD22重組小鼠 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein
4(KLK4)重組蛋白 Recombinant Kallikrein 4 (KLK4)
AGA重組人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 Protein
CD24 Protein Human 重組人 CD24 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
RBP4 Protein Canine 重組狗 RBP4 蛋白
4(KLK4)重組蛋白 Recombinant Kallikrein 4 (KLK4)
CD24 Protein Human 重組人 CD24 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CD22重組小鼠 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein
RBP4 Protein Canine 重組狗 RBP4 蛋白
AGA重組人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 Protein
人視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞大鼠釋放激素受體(GHR)試劑盒 ,英文名: GHR ELISA Kit
Porcine histamine (HIS) ELISA Kit 豬組胺(HIS)試劑盒
ELISA 小鼠腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(mouse BDNF) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforL-LDH(HumanL-LactateDehydrogenase)ELISAKit人L-乳酸脫氫酶
通用型EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitCRP雞C反應(yīng)蛋白
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代;若未超過(guò)80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作