詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
食管組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7129 |
細(xì)胞簡介:
人食管平滑肌分離自食管組織,;食管可分為頸段、胸段和腹段,,脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),,胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,,腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層,、黏膜下層,、肌層和外膜。其中,,肌層上1/3段為骨骼肌,,下1/3為平滑肌,中段為骨骼肌和平滑肌混合組成,。其中,,肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴(yán)格控制,,食管還有括約肌,,位于環(huán)狀軟骨水平的,稱為食管上括約??;位于食管下端,一部分在膈上,,穿過膈孔,,另一部分在膈下的高壓帶,稱為食管下括約肌,。食管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的人食管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人食管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠水通道蛋白試劑盒 小鼠水通道蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠水通道蛋白試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠水通道蛋白試劑盒,、小鼠水通道蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠抗試劑盒 小鼠抗試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗試劑盒,、小鼠抗eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠己糖激酶試劑盒 小鼠己糖激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠己糖激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠己糖激酶試劑盒、小鼠己糖激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠β甘露糖苷酶試劑盒 小鼠β甘露糖苷酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠β甘露糖苷酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠β甘露糖苷酶試劑盒、小鼠β甘露糖苷酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ovalbumin specific IgG (OVA sIgG) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)試劑盒
Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit 人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
deoxypyridinoline,DPD試劑盒兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEndomeiumAibody,EMAbELISAKit小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
著絲粒蛋白M抗體
SNAPC3蛋白抗體
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor 0.5mgShadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原
S100A6重組人 S100A6 / CACY 蛋白 Protein
CISD1 Protein Human 重組人 CISD1 / ZCD1 蛋白
IL35 Protein Human 重組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor 0.5mgShadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原
CISD1 Protein Human 重組人 CISD1 / ZCD1 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
IL35 Protein Human 重組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
S100A6重組人 S100A6 / CACY 蛋白 Protein
人食管平滑肌細(xì)胞大鼠嗜鉻蛋白A(CHGA)試劑盒 ,,英文名: CHGA ELISA Kit
Mouse vitamin D (VD) ELISA Kit 小鼠(VD)試劑盒
RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHDVIgM(HumanHepatitisDvirusIgM)ELISAKit人丁型肝IgM
細(xì)胞TEL激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitcath-K倉鼠組織蛋白酶K
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。