詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腎 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8174 |
細(xì)胞簡介:
人腎臟微血管內(nèi)皮分離自腎臟,;腎臟是人體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水分及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、等,,以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,,生成腎素,、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3,、前列腺素,、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎臟內(nèi)部的結(jié)構(gòu),,可分為腎實(shí)質(zhì)和腎盂兩部分。在腎縱切面可以看到,,腎實(shí)質(zhì)分內(nèi)外兩層:外層為皮質(zhì),,內(nèi)層為髓質(zhì),。腎皮質(zhì)位于腎實(shí)質(zhì)表層,富含血管,,新鮮時(shí)呈紅褐色,由一百多萬個(gè)腎單位組成,。每個(gè)腎單位由腎小體和腎小管所構(gòu)成,,部分皮質(zhì)伸展至髓質(zhì)錐體間,成為腎柱,。腎髓質(zhì)位于腎皮質(zhì)的深面,,血管較少,色淡紅,,為10-20個(gè)錐體所構(gòu)成,。腎錐體在切面上呈三角形。錐體底部向腎凸面,,向腎門,,錐體主要組織為集合管,錐體稱腎乳頭,,每一個(gè)乳頭有10-20個(gè)乳頭管,,向腎小盞漏斗部開口。在腎竇內(nèi)有腎小盞,,為漏斗形的膜狀小管,,圍繞腎乳頭。腎錐體與腎小盞相連接,。每腎有7~8個(gè)腎小盞,,相鄰2~3個(gè)腎小盞合成一個(gè)腎大盞。每腎有2~3個(gè)腎大盞,,腎大盞匯合成扁漏斗狀的腎盂,。腎盂出腎門后逐漸縮窄變細(xì),移行為輸尿管,。腎單位是腎臟結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,。腎小體包括腎小球和腎小囊。腎小體內(nèi)有一個(gè)毛細(xì)血管團(tuán),,稱為腎小球,,腎小球是個(gè)血管球。它由腎動(dòng)脈分支形成,。腎小球外有腎小囊包繞,。腎小囊分兩層,兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通,。腎小管匯成集合管,。若干集合管匯合成乳頭管,,尿液由此流入腎小盞。微血管又稱毛細(xì)血管,。分布于各種組織和細(xì)胞間的最微細(xì)的血管,。介于微動(dòng)脈和微靜脈之間。平均直徑7~9微米,,數(shù)量極多,,成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,,厚約0.5微米,。基膜外面有薄層結(jié)締組織,,其中有纖維細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等。最細(xì)的毛細(xì)血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔,,較粗的毛細(xì)血管由2~3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成,。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的毛細(xì)血管,,內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),,稱連續(xù)毛細(xì)血管;分布于內(nèi)分泌腺,、腎臟等處的毛細(xì)血管,,除有縫隙連接外,細(xì)胞本身有許多小孔,,(孔徑800~1000埃),,稱有孔毛細(xì)血管;分布于肝,、脾,、骨髓及某些內(nèi)分泌腺的毛細(xì)血管,管腔擴(kuò)大,,稱血竇,。毛細(xì)血管的管壁薄、通透性大,、管徑細(xì)(8~10微米),、數(shù)量多、血流速度慢,,這些特點(diǎn)使其成為血液與組織液進(jìn)行物質(zhì)交換的場所,,又稱交換血管。血竇(sinusoid)由毛細(xì)血管管腔擴(kuò)大而成,,竇壁的一般結(jié)構(gòu)與毛細(xì)血管壁相同,,由單層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,,內(nèi)皮細(xì)胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結(jié)構(gòu)各有差別,。脾血竇的內(nèi)皮細(xì)胞間有較寬裂隙,;肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞是不連續(xù)的,有較寬的細(xì)胞隙(0.1~0.5微米),;肝,、脾血竇的基膜不完整或無基膜,通透性比毛細(xì)血管大,,較大的蛋白質(zhì)和血細(xì)胞可以通過。肝血竇壁內(nèi)有枯否細(xì)胞,,脾血竇內(nèi)外有巨噬細(xì)胞,,這兩種細(xì)胞都有吞噬能力,可吞噬清除血液中的異物,、細(xì)菌等有害物質(zhì),,是機(jī)體單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的重要組成分。某些內(nèi)分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的人腎臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶消化,,結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的人腎臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、EGF,、bFGF,、IGF、VEGF,、Heparin,、Hydrocortisone、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
人腎臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒 豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒,、豚鼠免疫球蛋白G1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
豚鼠免疫球蛋白E試劑盒 豚鼠免疫球蛋白E試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豚鼠免疫球蛋白E試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠免疫球蛋白E試劑盒、豚鼠免疫球蛋白Eeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒 豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒,、豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒、豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠釋放激素(GH)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat calf iestine alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 大鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒
HumanSerumamyloidA,SAAELISAKit 人血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanbasicfibroblastgrowthfactor,bFGF試劑盒人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物質(zhì)粒菌化試劑盒20次
HumaerminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原鈣粘蛋白β4抗體
RNA結(jié)合蛋白9抗體
ACPP重組小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 Protein
半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白 Recombinant Galectin 4 (GAL4)
AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 Protein
FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白
IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白
AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mgAMH/MIS Muellerian抑制因子抗原
FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白
LY9重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 Protein
HEPACAM2 Protein Rat 重組大鼠 HepaCAM2 蛋白
ANGPTL4重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
人腎臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠斯鈣素1(STC1)試劑盒 ,,英文名: STC1 ELISA Kit
Mouse deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒
ratNoradrenaline,NAELISAKit 大鼠去甲(NA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHIF-1Alpha(Mousehypoxia-induciblefactor1Alpha)ELISAKit小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α
細(xì)胞RSK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKit26SPSM大鼠26S蛋白酶體