詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡介:
人腎小球內(nèi)皮分離自腎組織,;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、等,,以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,,生成腎素,、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3,、前列腺素,、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造,。血液經(jīng)由入球小動脈進(jìn)入腎小球,。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,,而是流入出球小動脈,。在腎小球內(nèi),,微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行,。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi),。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞是一類特殊微血管類型的細(xì)胞,。細(xì)胞為圓形,、多角形,單層貼壁生長,;細(xì)胞質(zhì)豐富,,細(xì)胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞被覆于腎小球毛細(xì)血管壁腔側(cè),,與血流直接接觸,,是腎小球?yàn)V過膜的道屏障,可粘附細(xì)菌和白細(xì)胞,,修復(fù)基底膜,,并有抗凝、抗血栓的作用,;所以,,體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞在免疫學(xué)和病理生理學(xué)領(lǐng)域中具有重要的研究價(jià)值。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小球內(nèi)皮采用先機(jī)械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球,、后用膠原酶消化,,結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小球內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠免疫球蛋白A試劑盒 豚鼠免疫球蛋白A試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠免疫球蛋白A試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠免疫球蛋白A試劑盒,、豚鼠免疫球蛋白Aeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒 豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒,、豚鼠卵清蛋白特異性IgGeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒 豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒、豚鼠卵清蛋白特異性IgEeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒 豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒,、豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 人酶2(CA-2)試劑盒
HumanoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2試劑盒人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物中性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(neualinvease)活性比色法定量試劑盒(胞質(zhì))20次
Humaenascin-R,TN-RELISAKit人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒規(guī)格:96T/48T
應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1重組兔單克隆抗體
Ras激酶抑制因子連接增強(qiáng)蛋白3抗體
GPA33重組小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 蛋白 Protein
Annexin Ⅲ peptide 膜粘連蛋白A3抗體 0.5mgAnnexin Ⅲ peptide 膜粘連蛋白A3抗體
KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
FLRT2 Protein Human 重組人 FLRT2 蛋白
C Protein Rat 重組大鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白
白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)重組蛋白 Recombinant Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM)
FLRT2 Protein Human 重組人 FLRT2 蛋白
IFNA2重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IFNA2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白
PDGFRB重組人 PDGFRB / PDGFR-1 / CD140b 蛋白 Protein
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞大鼠速激肽受體1(TACR1)試劑盒 ,,英文名: TACR1 ELISA Kit
Mouse dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 小鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)試劑盒
ratProstaglandinE1,PG-E1Elisakit 大鼠前列腺素E1(PGE1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHIS(HumanHistamine)ELISAKIT人組胺
細(xì)胞ROS激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitColⅢ大鼠Ⅲ型膠原
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作