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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7249 |
細胞簡介：
人腎實質分離自腎組織,；腎臟是機體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖,、蛋白質,、氨基酸、鈉離子,、鉀離子,、等，以調節(jié)水,、電解質平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內分泌功能,，生成腎素、促紅細胞生成素,、活性維生素D3,、前列腺素、激肽等,，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能，保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定,，使新陳代謝得以正常進行,。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法，然而這種方法受到供體腎短缺的限制,。腎細胞移植可部分解決供體腎短缺的問題,，是未來可以替代腎臟移植的方法。因此,，體外腎細胞的培養(yǎng)受到國內外有關專家的密切關注,。原代腎細胞作為一種常用的腎臟毒理學研究對象，其分離方法主要有機械研磨分離法和酶消化法,，酶消化法因對細胞損傷小,、分離效果好而優(yōu)于機械研磨分離法；目前常用的酶消化法主要是消化法和膠原酶消化法,。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,，進行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的人腎實質采用膠原酶-混合消化法結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人腎實質經(jīng)檢測,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔骨保護素(OPG)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
兔胰淀素(Amylin)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠K1(VK1)試劑盒
Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancommonacelymphocyticleukaemiaaigen,CALLA試劑盒人普通急性淋巴細胞白血病抗原(CALLA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織AURORA-C激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPyridinolinecrosslinks,PYDELISAKit人膠原交聯(lián)(PYD)試劑盒規(guī)格：96T/48T
異戊烯半胱羧基甲基轉移酶抗體
Rabbit Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys64) antibody
IL13RA2重組小鼠 IL13RA2 / CD213A2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8 0.5mgCDK8(Cyclin Dependent Kinase 8) 周期素依賴性激酶8抗原
SLITRK4重組人 SLITRK4 / Slitrk4 蛋白 Protein
HSPA1A Protein Human 重組人 HSP70 / HSPA1A 蛋白
TNFSF9 Protein Mouse 重組小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白
CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8 0.5mgCDK8(Cyclin Dependent Kinase 8) 周期素依賴性激酶8抗原
HSPA1A Protein Human 重組人 HSP70 / HSPA1A 蛋白
IL13RA2重組小鼠 IL13RA2 / CD213A2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
TNFSF9 Protein Mouse 重組小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白
SLITRK4重組人 SLITRK4 / Slitrk4 蛋白 Protein
人腎實質細胞大鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)試劑盒 ,，英文名： M2-PK ELISA Kit
Mouse alpha L fucosidase (AFU) ELISA Kit 小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒
ELISA 小鼠上皮中性粒細胞活化肽-78(mouse ENA-78) 進口分裝
CLIAKitforKLK11(HumanKallikrein11)ELISAKit人11
通用型腸桿菌(EerobacteriaceaSTX2)試劑盒20次
ELISAKitHIS大鼠組胺
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