詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7265 |
細胞簡介:
人腎成纖維分離自腎組織,;腎臟是機體的重要器官,,它的基本功能是生成尿液,,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、等,,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,,生成腎素、促紅細胞生成素,、活性維生素D3,、前列腺素、激肽等,,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,,使新陳代謝得以正常進行。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損以及骨創(chuàng)傷的修復有著十分重要的作用,。腎成纖維細胞是腎臟結(jié)締組織中最重要的細胞類型,在體外培養(yǎng)中,,一般大致成梭形,、多角形或不規(guī)則形等,,為貼壁生長型細胞。剛分離的腎成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細胞質(zhì)透明,,細胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。其主要功能有:①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分,;②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子;③受損后影響系膜細胞和上皮細胞,,進而影響腎臟病變,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的人腎成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人腎成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒 小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒,、小鼠Ⅰ型膠原C端肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠8異前列腺素試劑盒 小鼠8異前列腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠8異前列腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠8異前列腺素試劑盒,、小鼠8異前列腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒 小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒,、小鼠8羥基脫氧鳥苷eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠6前列腺素試劑盒 小鼠6前列腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠6前列腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠6前列腺素試劑盒、小鼠6前列腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒
Human aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 人水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒
Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 人酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒 進口分裝
Humanapelin13,AP13試劑盒人apelin13(AP13)試劑盒
植物氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(次氯酸離子)20次
Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒
胰島素受體β抗體
PE標記人CD45RO單克隆抗體
S100A9重組小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 標簽) Protein
次0酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)重組蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)
ALOX15B重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽)
IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 標簽)
ADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽)
FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白
TFAP2C重組人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 標簽) Protein
人腎成纖維細胞大鼠髓細胞觸發(fā)受體1(EM1)試劑盒 ,,英文名: EM1 ELISA Kit
Mouse glycogen phosphorylase BB (GP-BB) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)試劑盒
ratprolactin,PRLELISAKit 大鼠催乳素(PRL)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHIV(Humanai-immunodeficiencyvirusaibody)ELISAKit人抗人類免疫缺陷病毒抗體
細胞PYK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKit5-HT大鼠5羥色胺