詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腦組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7388 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人神經(jīng)少突膠質(zhì)分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個(gè)半球,,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積),;半球表面有很多深淺不等的溝或裂,,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積,;大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔,,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉,、顳葉,、枕葉四大部分。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標(biāo)本中,,少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小,,其突起也較小而少,呈珠狀,,故被稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞,。但是用特異性免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示的少突膠質(zhì)細(xì)胞,其突起并不少,,而且還有許多分支,。少突膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結(jié)構(gòu),、協(xié)助生物電信號(hào)的跳躍式高效傳遞并維持和保護(hù)神經(jīng)元的正常功能,。其異常不僅會(huì)導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變,還會(huì)引起神經(jīng)元損傷或精神類疾病,,甚至可以引發(fā)腦腫瘤,。根據(jù)少突膠質(zhì)細(xì)胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質(zhì)細(xì)胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的白質(zhì)的神經(jīng)纖維束之間,;②神經(jīng)細(xì)胞周少突膠質(zhì)細(xì)胞(perineuronal-oligodendrocyte),,分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)區(qū),常位于神經(jīng)細(xì)胞周圍,,與神經(jīng)細(xì)胞的關(guān)系密切,,故又稱為神經(jīng)細(xì)胞周衛(wèi)星細(xì)胞(perineuronal-satellite-cell),但在神經(jīng)細(xì)胞胞體與此類細(xì)胞之間亦常有星形膠質(zhì)細(xì)胞的薄片狀突起分隔,;③血管周少突膠質(zhì)細(xì)胞(pcrivascular-oligodendrocyte),,主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管周圍。少突膠質(zhì)細(xì)胞形成的髓鞘膜是最為特化和復(fù)雜動(dòng)物細(xì)胞膜之一,,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結(jié)構(gòu),。如半乳糖腦苷脂(GC),它是髓鞘的一種主要類脂,,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞是一種比較早的免疫鑒定方法,。近十年來(lái),神經(jīng)發(fā)育學(xué)科進(jìn)展較快,,更多的少突膠質(zhì)細(xì)胞分子標(biāo)記物被鑒定出來(lái),,如PDGFRa、Mbp,、CNP,、SOX-10。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人神經(jīng)少突膠質(zhì)采用消化、混合細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)缺失培養(yǎng),、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過(guò)專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人神經(jīng)少突膠質(zhì)經(jīng)GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF-AA,、bFGF,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 不增殖,;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠5羥色胺試劑盒 小鼠5羥色胺試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠5羥色胺試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠5羥色胺試劑盒,、小鼠5羥色胺eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠5核苷酸酶試劑盒 小鼠5核苷酸酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠5核苷酸酶試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠5核苷酸酶試劑盒,、小鼠5核苷酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠25羥基試劑盒 小鼠25羥基試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠25羥基試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠25羥基試劑盒、小鼠25羥基eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒,、小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠肝病毒(MHV)試劑盒
Human dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 人雙氫(DHT)試劑盒
Humansolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit 人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanai-toxoplasmaIgGaibody,ai-toxIgG試劑盒人抗弓形體IgM抗體(ai-toxIgM)試劑盒
植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法測(cè)定試劑盒(單線態(tài)氧氣)20次
Humanansferrieceptor,,TFRELISAKit人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒
血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體
PECI蛋白抗體
YWHAB重組食蟹猴 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein
MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7 0.5mgMMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質(zhì)金屬蛋白酶-7(抗原)
MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽)
ESM1 Protein Mouse 重組小鼠 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7 0.5mgMMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質(zhì)金屬蛋白酶-7(抗原)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽)
YWHAB重組食蟹猴 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein
ESM1 Protein Mouse 重組小鼠 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
人神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞大鼠糖蛋白A33(GPA33)試劑盒 ,,英文名: GPA33 ELISA Kit
Mouse glucoprotein 130 (gp130) ELISA Kit 小鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒
RatEsadiol,E2ELISAKit 大鼠雌二醇(E2)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHLE(Humanleukocyteexastase)ELISAKit人白細(xì)胞彈性蛋白酶
細(xì)胞PKC激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCNP大鼠C型尿肽