詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
乳腺癌組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7455 |
細(xì)胞簡介:
人乳腺癌組織源分離自癌組織;癌(cancer)是指起源于上皮組織的惡性腫瘤,,是惡性腫瘤中最常見的一類,。相對應(yīng)的,起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤,。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名,,如腎母細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤,。癌癥具有細(xì)胞分化和增殖異常,、生長失去控制、浸潤性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征,,其發(fā)生是一個(gè)多因子,、多步驟的復(fù)雜過程,分為致癌,、促癌,、演進(jìn)三個(gè)過程,與吸煙,、感染,、職業(yè)暴露、環(huán)境污染,、不合理膳食、遺傳因素密切相關(guān),。癌細(xì)胞,,是一種變異的細(xì)胞,是產(chǎn)生癌癥的病源,。癌細(xì)胞與正常細(xì)胞不同,,有無限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點(diǎn),,能夠無限增殖并破壞正常的細(xì)胞組織,。癌細(xì)胞除了分裂失控外(能進(jìn)行多極分裂),還會(huì)局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分,。分惡性和良性兩種,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化,、經(jīng)Percoll離心純化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌組織源經(jīng)檢測,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素5(IL-5)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human dehydroepiandrosterone (DHEA) ELISA Kit 人脫氫表雄酮(DHEA)試劑盒
Humanspleeyrosinekinase,SykELISAKit 人脾臟酪激酶(Syk)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancalnexin,CNX試劑盒人鈣聯(lián)蛋白(CNX)試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒感染試劑盒20次
Humansolubleierleukin-2receptor,,IL-2sRαELISAKit人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)試劑盒規(guī)格:96T/48T
嗅覺受體5AS1抗體
Notch1蛋白抗體
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase 0.5mgPLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 型纖溶酶原激活因子(多肽)
CDK1重組人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
GFER Protein Human 重組人 GFER / ALR 蛋白
FGF1 Protein Human 重組人 aFGF / FGF1 蛋白
TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 0.5mgTRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗原
GFER Protein Human 重組人 GFER / ALR 蛋白
GFP重組水母 GFP 蛋白 Protein
IL32 Protein Human 重組人 Interleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標(biāo)簽)
AMICA1重組人 JAML / AMICA 蛋白 Protein
人乳腺癌組織源細(xì)胞大鼠糖原合酶激酶3β(GSK3β)試劑盒 ,英文名: GSK3β ELISA Kit
Mouse carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 小鼠酶2(CA-2)試劑盒
RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 大鼠游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHMGCS1(Human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1)ELISAKit人3-羥基-3-甲基戊二酰合酶1
細(xì)胞PKCη激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitFlt3大鼠FMS樣酪激酶3