詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源:乳腺癌組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡介:
人乳腺癌血管內(nèi)皮分離自患有乳腺癌的女性乳腺組織,;女性乳腺是由皮膚、纖維組織,、乳腺腺體和脂肪組成的,,乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發(fā)生在女性,,男性僅占1%,。乳腺并不是維持機(jī)體生命活動的重要器官,原位乳腺癌并不致命,;但由于乳腺癌細(xì)胞喪失了正常細(xì)胞的特性,,細(xì)胞之間連接松散,容易脫落,。癌細(xì)胞一旦脫落,,游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身,形成轉(zhuǎn)移,,危及生命,。目前,乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
素 英文名稱: Human Renin 規(guī)格: 英文縮寫: RN
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1 英文名稱: Human Retinoblastoma Protein 1 規(guī)格: 英文縮寫: RBP1
松弛素-2 英文名稱: Human Relaxin-2 規(guī)格: 英文縮寫: RLN-2
S-100蛋白 英文名稱: S-100protein 規(guī)格: 英文縮寫: S-100
豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒 ,,英文名: TGF-β1 ELISA Kit
Human protein kinase A (PKA) ELISA Kit 人蛋白激酶A(PKA)試劑盒
MonkeyMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit巨噬細(xì)胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBMP-6(MouseBonemorphogeneticprotein6)ELISAKit小鼠骨形成蛋白6
細(xì)菌氫鉍選擇瓊脂平板50個(gè)
rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4重組兔單克隆抗體
NARFL蛋白抗體
CD53重組小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 標(biāo)簽) Protein
基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)
CD81重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein
IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白
基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)
IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CD53重組小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 標(biāo)簽) Protein
EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白
CD81重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein
人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄肽(CA)試劑盒 ,英文名: CA ELISA Kit
Monkey macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)試劑盒
RatCompleme3,C3ELISAKit 大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFSH(mousefollicle-stimulatinghormone)ELISAKit小鼠促卵泡素
細(xì)胞還原型(GSH)濃度高效液相色譜定量試劑盒50次
RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作