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人乳腺癌成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):308

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7524 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
人乳腺癌成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:KCNH3蛋白抗體 FBLL1蛋白抗體 RNA結(jié)合蛋白38抗體 人神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞 兔腹腔巨噬細(xì)胞 SNU-C1人結(jié)腸癌細(xì)胞 SNU-1 (人胃癌細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

人乳腺癌成纖維細(xì)胞

人乳腺癌成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

乳腺癌組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7524

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

人乳腺癌成纖維分離自患有乳腺癌的女性乳腺組織,;女性乳腺是由皮膚,、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的,,乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤,。乳腺癌中99%發(fā)生在女性,男性?xún)H占1%,。乳腺并不是維持機(jī)體生命活動(dòng)的重要器官,,原位乳腺癌并不致命,;但由于乳腺癌細(xì)胞喪失了正常細(xì)胞的特性,,細(xì)胞之間連接松散,容易脫落,。癌細(xì)胞一旦脫落,,游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身,形成轉(zhuǎn)移,,危及生命,。目前,,乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見(jiàn)腫瘤。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),,在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的乳腺癌成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長(zhǎng),,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦,、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%CO2,,5%

人乳腺癌成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

人乳腺癌成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠骨保護(hù)素配體(mouse OPGL)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠血小板活化因子(mouse PAF)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(mouse PAP)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠血小板相關(guān)抗體IgG(mouse PAIgG)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 大鼠抗抗體(AsAb)試劑盒

HumanconcanavalinA,ConAELISAKit 人刀A(ConA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanangiopoietin-likeprotein3,ANGPTL3試劑盒人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物鈣ATP(Ca++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20

IL-1αELISAKit魚(yú)類(lèi)白介素1α(IL-1α)試劑盒規(guī)格:96T/48T

信號(hào)傳導(dǎo)T淋巴細(xì)胞活化相關(guān)蛋白抗體

Myc tag標(biāo)簽單克隆抗體

CCL3重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein

CX36 (Connexin-36 0.5mgCX36 (Connexin-36) 間隙連接蛋白36抗原

GPR56重組人 GPR56 / TM7LN4 蛋白 Protein

DUSP14 Protein Human 重組人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)

F7 Protein Mouse 重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

CX36 (Connexin-36 0.5mgCX36 (Connexin-36) 間隙連接蛋白36抗原

DUSP14 Protein Human 重組人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)

CCL3重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein

F7 Protein Mouse 重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

GPR56重組人 GPR56 / TM7LN4 蛋白 Protein

人乳腺癌成纖維細(xì)胞大鼠鐵反應(yīng)元件結(jié)合蛋白2(IREB2)試劑盒 ,,英文名: IREB2 ELISA Kit

Mouse myeloperoxidase specificity of ai neuophil cytoplasmic aibody IgG (MPO-ANCA IgG)ELISA Kit 小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)試劑盒

RatFreeThyroxine,FT4ELISAKit 大鼠游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHO-1(Mousehemeoxygenase1)ELISAKit小鼠血紅素氧合酶1

細(xì)胞PKCβ1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

大鼠N-乙?;?span>-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴(lài)氨酰-脯大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴(lài)氨酰-脯大鼠N-乙?;?span>-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴(lài)氨酰-

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。


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