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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
脂肪組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7367 |
細胞簡介：
人前脂肪分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成,，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉,；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用,。它們影響胰島素敏感性、血壓水平,、內(nèi)皮功能,、纖溶活動及炎癥反應,，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng),。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細胞,；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細胞。前脂肪細胞呈梭形,，有分裂和增殖的能力,；成熟的脂肪細胞呈圓形，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力,。由于前脂肪細胞是一類具有增殖和向脂肪細胞分化能力的特異化前體細胞,，與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細胞是一種類成纖維細胞,，在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì),，最終成為成熟的脂肪細胞。前脂肪細胞對外界機械損傷的抵抗力較強,，可望成為軟組織缺損的有益填充物,。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介：
公司實驗室分離的人前脂肪采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠雌二醇受體(ER)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗抗體(AsAb)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 人熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒
Humanmembraneattackcomplex,MACELISAKit 人膜攻擊復合物(MAC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAngiotensinⅡReceptor2aibody,AT2R-Ab試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物甘露糖6-0酸異構(gòu)酶(mannose-6-phosphateisomerase;MPI)電泳分析試劑盒5次
humanβ-tubulin,TUBBELISAKit人β-微管蛋白(TUBB)試劑盒規(guī)格：96T/48T
鋅指蛋白ZBTB5抗體
MON2蛋白抗體
CD27重組食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK 0.5mgMAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK) 原活化蛋白激酶3抗原
RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein
DUSP3 Protein Human 重組人 DUSP3 / VHR 蛋白
GLA Protein Mouse 重組小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 蛋白
MAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK 0.5mgMAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK) 原活化蛋白激酶3抗原
DUSP3 Protein Human 重組人 DUSP3 / VHR 蛋白
CD27重組食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標簽) Protein
GLA Protein Mouse 重組小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 蛋白
RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein
人前脂肪細胞大鼠同種異體移植癥因子1(AIF1)試劑盒 ，英文名： AIF1 ELISA Kit
Mouse myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 小鼠髓過氧化物酶(MPO)試劑盒
RatInsulin,INSELISAKit 大鼠胰島素(INS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHO-2(Mousehemeoxygenase2)ELISAKit小鼠血紅素氧合酶2
細胞PIM2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitS-100B大鼠S100B蛋白
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