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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
氣管 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7063 |
細胞簡介：
人氣管平滑肌分離自氣管組織；氣管（Trachea）,，呼吸器官的一部分,；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,，與環(huán)狀軟骨相連,；向下至第四、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處,，分左,、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈,。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構成,，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),，缺口向后,，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接,，保持了持續(xù)張開狀態(tài),。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮,，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體,。氣管平滑肌是氣管的重要結構組成之一,，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用,；能夠保持氣道張力，維持氣道管狀形態(tài),，從而有利于氣體流通,，保持肺部通氣。氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細胞密度低時,，常交織成網狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。氣管平滑肌細胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,，其增生、肥大是氣道重塑的關鍵,。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,，應將原代細胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,，進行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的人氣管平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合組織貼塊法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測：
公司實驗室分離的人氣管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數,。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產品：
豚鼠內皮素1(ET-1)試劑盒 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 96T/48T
小鼠催產素(OT)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat coagulation factor XII (F XII) ELISA Kit 大鼠Ⅻ(FⅫ)試劑盒
HumanComplemefragme5a,C5aELISAKit 人補體片斷5a(C5a)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6試劑盒人堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物脂質過氧化氫(H2O2)活性比色法定量試劑盒20次
Humaestoteronerecepter,，ELISAKit人睪同受體()試劑盒規(guī)格：96T/48T
鋅指蛋白186抗體
Irx3蛋白抗體
ERBB2重組大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein
HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1 0.5mgHMGB1 (High Mobility Group Box protein 1) 高遷移率族蛋白-1(抗原)
IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein
FKBP7 Protein Human 重組人 PPIase / FKBP7 蛋白
TFPI2 Protein Mouse 重組小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白
HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1 0.5mgHMGB1 (High Mobility Group Box protein 1) 高遷移率族蛋白-1(抗原)
FKBP7 Protein Human 重組人 PPIase / FKBP7 蛋白
ERBB2重組大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein
TFPI2 Protein Mouse 重組小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白
IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein
人氣管平滑肌細胞大鼠吻素受體(KISS1R)試劑盒 ,，英文名： KISS1R ELISA Kit
Mouse dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 小鼠雙氫睪酮(DHT)試劑盒
MouseSmad7ELISAKit 小鼠信號轉導分子7(Smad7)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHSL(Humanhormonesensitivelipase)ELISAKit人激素敏感性脂肪酶
細胞NADPH還原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitOrexinA大鼠阿立新A
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