人臍靜脈血來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶KAT7抗體 信號(hào)肽肽酶SPP抗體 RAN結(jié)合蛋白6抗體 人前列腺平滑肌細(xì)胞 兔骨髓單核細(xì)胞 SW1271小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 Bewo (人絨毛膜腫瘤細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：人臍靜脈血來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞

組織來(lái)源：臍帶血

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代；不建議多次傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人臍靜脈血來(lái)源內(nèi)皮祖分離自臍靜脈血,；內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,，亦稱為成血管細(xì)胞（Angioblast），是一群具有游走特性,，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù),。研究顯示，內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病,、外周血管疾病,、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,，EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn),。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍靜脈血來(lái)源內(nèi)皮祖采用密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍靜脈血來(lái)源內(nèi)皮祖經(jīng)CD34免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。

收到細(xì)胞如何處理？

1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代,；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒   96T/48T

小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒   96T/48T

小鼠層連蛋白/板層素(LN)試劑盒   96T/48T

小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble cell differeiation aigen 30 ligand (sCD30L) ELISA Kit 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒

HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD樣受體(NLR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-filaggrinaibody,AFA試劑盒人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

HumanVitaminD，VDELISAKit人(VD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

鋅指蛋白109抗體

IAH1蛋白抗體

TLR2重組大鼠 TLR2 蛋白 Protein

GAD-65 (glutamate decarboxylase 0.5mgGAD-65 (glutamate decarboxylase) 谷脫羧酶-65(C端多肽)

CD82重組人 CD82 / KAI-1 蛋白 Protein

ENPP5 Protein Human 重組人 ENPP5 蛋白

SLAMF6 Protein Mouse 重組小鼠 SLAMF6 / Ly108 蛋白

GAD-65 (glutamate decarboxylase 0.5mgGAD-65 (glutamate decarboxylase) 谷脫羧酶-65(C端多肽)

ENPP5 Protein Human 重組人 ENPP5 蛋白

TLR2重組大鼠 TLR2 蛋白 Protein

SLAMF6 Protein Mouse 重組小鼠 SLAMF6 / Ly108 蛋白

CD82重組人 CD82 / KAI-1 蛋白 Protein

人臍靜脈血來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞大鼠無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3(W3)試劑盒 ,，英文名： W3 ELISA Kit

Mouse leptin (LEP) ELISA Kit 小鼠瘦素(LEP)試劑盒

MousecomplemefactorH,CFHELISAKit 小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHSPgp96ELISAKit大鼠熱休克蛋白糖蛋白96

細(xì)胞NADH心肌黃酶活性染色試劑盒100次

ELISAKitIL-1大鼠白介素1