詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人臍靜脈平滑肌細胞
組織來源:臍帶組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞簡介:
人臍靜脈平滑肌分離自臍帶組織,;它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用,。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),,臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈,。在子宮中,,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤,,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒,。血管平滑肌是許多重大血管疾病的細胞基礎(chǔ);血管平滑肌細胞的異常增加的生長潛力在血管疾病發(fā)生過程中起決定作用,。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,,同時從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細胞方法相對成熟,使得體外培養(yǎng)的臍靜脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。臍靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細胞貼壁伸展,,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細胞匯合,,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏;細胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。
方法簡介:
公司實驗室分離的人臍靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人臍靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
二,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
a),、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
B2/核黃素 英文名稱: Human Vitamin B2 規(guī)格: 英文縮寫: VB2
血管性血友病因子裂解酶 英文名稱: von Willebrand factor-clea-ving protease 規(guī)格: 英文縮寫: vWF-cp /ADAMTS13
氧化酶 英文名稱: Human Xahione oxidase 規(guī)格: 英文縮寫: XOD
壞死因子β 英文名稱: Rat Tumor Necrosis Factor β 規(guī)格: 英文縮寫: TNF β
小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA 試劑盒
Human placeal protein (PP) ELISA Kit 人胎盤蛋白(PP)試劑盒
HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit 人前心肽(Pro-ANP)試劑盒 進口分裝
Humanaialnaiureticfactor,ANF試劑盒人心納素(ANF)試劑盒
植物源性食品櫻桃(cherry)試劑盒20次
Humahrombospondin1,,TSP-1ELISAKit人血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒
心肌病相關(guān)蛋白2抗體
HJURP蛋白抗體
IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein
Insulin Receptor- Beta(ISR- Beta 0.5mgInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島素受體-β(抗原)
ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標簽) Protein
FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白
SMPD1 Protein Mouse 重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 (His 標簽)
Insulin Receptor- Beta(ISR- Beta 0.5mgInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島素受體-β(抗原)
FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白
IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein
SMPD1 Protein Mouse 重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 (His 標簽)
ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標簽) Protein
人臍靜脈平滑肌細胞大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員3A(W3A)試劑盒 ,,英文名: W3A ELISA Kit
Mouse eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)試劑盒
Mouseplatelet-derivedgrowthfactor-BB,PDGF-BBELISAKit 小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHSPgp96(HumanHeatShockProteinglycoprotein96)ELISAKit人熱休克蛋白糖蛋白96
細胞MUSK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-鼠白介素10
收到細胞如何處理?
1,、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3,、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作