詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 多核巨細(xì)胞 | YS-01X7352 |
細(xì)胞簡介:
人破骨分離自骨組織和骨髓,;破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞,位于骨組織表面的淺凹處,。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng),,其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化,。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機(jī)制,。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,,不能增殖和傳代,,只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時(shí)間較短,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人破骨采用機(jī)械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人破骨經(jīng)TRAP染色檢測,,純度可達(dá)30%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 多核巨細(xì)胞
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒 小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒,、小鼠0酸肌醇3激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒 小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒、小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒 小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒,、小鼠細(xì)胞蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠可溶性試劑盒 小鼠可溶性試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠可溶性試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠可溶性試劑盒,、小鼠可溶性eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠前列腺素F(PGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 人抗復(fù)合物(TAT)試劑盒
HumanArginase,ArgELISAKit 人精酶(Arg)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-α試劑盒豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次
MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
纖維母細(xì)胞生長因子4抗體
GLIS1蛋白抗體
IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原
USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein
CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白
DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原
CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白
USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein
人破骨細(xì)胞大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM2)試劑盒 ,英文名: ICAM2 ELISA Kit
Mouse somatostatin (SS) ELISA Kit 小鼠(SS)試劑盒
MouseCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit 小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSP-40(HumanHeatShockProtein40)ELISAKit人熱休克蛋白40
細(xì)胞MAPKAPKINASE3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-17大鼠白介素17
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮,;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。