化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | YS-01X7385 |
細(xì)胞簡介：
人皮層神經(jīng)元分離自腦皮層組織,；皮層神經(jīng)元細(xì)胞是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,。神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細(xì)胞，它由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成,。在長的軸突上套有一層鞘,，組成神經(jīng)纖維，它的末端的細(xì)小分支叫做神經(jīng)末梢,。細(xì)胞體位于腦,、脊髓和神經(jīng)節(jié)中，細(xì)胞突起可延伸至全身各器官和組織中,。細(xì)胞體是細(xì)胞含核的部分,，其形狀大小有很大差別，直徑約4-120微米,。核大而圓,，位于細(xì)胞中央，染色質(zhì)少,，核仁明顯,。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有斑塊狀的核外染色質(zhì)，還有許多神經(jīng)元纖維,。細(xì)胞突起是由細(xì)胞體延伸出來的細(xì)長部分,，又可分為樹突和軸突。每個(gè)神經(jīng)元可以有一或多個(gè)樹突,，可以接受刺激并將興奮傳入細(xì)胞體,。每個(gè)神經(jīng)元只有一個(gè)軸突，可以把興奮從胞體傳送到另一個(gè)神經(jīng)元或其他組織,，如肌肉或腺體,。皮質(zhì)神經(jīng)元是大腦皮質(zhì)的主要組成細(xì)胞之一，是大腦進(jìn)行功能活動(dòng)調(diào)節(jié)的基本單位,，參與動(dòng)物多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程,。通過形態(tài)學(xué)觀察顯示神經(jīng)元從貼壁,、伸出突起開始；突起逐漸增多,，而后突起進(jìn)一步增多并逐漸成網(wǎng),，同時(shí)細(xì)胞胞體增大，周邊光暈明顯,。10-12d細(xì)胞最為豐滿,，隨后神經(jīng)元開始裂解，突起逐漸減少,，細(xì)胞已退化變性,，輪廓模糊，光暈消失,，細(xì)胞變形。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4,、長期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人皮層神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人皮層神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒 96T/48T
小鼠脫氫酶E1(PDHE1)試劑盒 96T/48T
小鼠激酶M2型同工酶(M2-PK)試劑盒 96T/48T
小鼠激酶(PK)試劑盒 96T/48T
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human killer cell lectin like receptor (KLR) ELISA Kit 人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)試劑盒
Humaecombinationactivatinggene2,RAG-2ELISAKit 人重組激活基因2(RAG-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-gliadinaibody,AGA試劑盒人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物賴(lysine)含量熒光定量試劑盒20次
HumanVitaminB12,，VB12ELISAKit人B12(VB12)試劑盒規(guī)格：96T/48T
細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白1抗體
FITM1蛋白抗體
COL4A3重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3 0.5mgENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原
CLEC3B重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白 Protein
ENTPD5 Protein Human 重組人 ENTPD5 蛋白
CES5A Protein Mouse 重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白
ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3 0.5mgENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原
ENTPD5 Protein Human 重組人 ENTPD5 蛋白
COL4A3重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CES5A Protein Mouse 重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白
CLEC3B重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白 Protein
人皮層神經(jīng)元細(xì)胞大鼠細(xì)胞絨毛蛋白(CVL)試劑盒 ,，英文名： CVL ELISA Kit
Mouse kidney injury molecule 1 (Kim-1) ELISA Kit 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)試劑盒
Mousecardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHsp-60ELISAKit大鼠熱休克蛋白60
細(xì)胞LYNB激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-1β大鼠白介素1β
化工儀器網(wǎng)