詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:人膀胱移行上皮細(xì)胞
組織來(lái)源:膀胱組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人膀胱上皮分離自膀胱組織;膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官,,在哺乳類動(dòng)物,,它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu),位于骨盆內(nèi),,其后端開(kāi)口與尿道相通,。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出,。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)向外為黏膜層,、肌層和外膜,。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,稱為逼尿肌,,逼尿肌收縮,,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出,。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,,防止尿液自膀胱漏出,。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌,、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織)。其主要作用有:①組成過(guò)濾屏障內(nèi)壁的重要部分,;②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子,;③受損后影響系膜細(xì)胞和上皮細(xì)胞,進(jìn)而影響腎臟病變,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人膀胱移行上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人膀胱移行上皮經(jīng)Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔p物質(zhì)(SP)試劑盒 96T/48T
兔p53(p53)試劑盒 96T/48T
兔C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒 96T/48T
兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒 96T/48T
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human motilin (MTL) ELISA Kit 人胃動(dòng)素(MTL)試劑盒
HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISAKit 人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素(irGH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCoicosterone,CO試劑盒人皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CHK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinPhosphatase,PPELISAKit人蛋酸酶(PP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞色素P450 17A1重組兔單克隆抗體
FITC標(biāo)記人CD40單克隆抗體
ANGPT2重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
結(jié)蛋白(Des)重組蛋白 Recombinant Desmin (Des)
CEP57重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
ICOSLG Protein Human 重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白
HA Protein H15N2 重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
結(jié)蛋白(Des)重組蛋白 Recombinant Desmin (Des)
ICOSLG Protein Human 重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白
ANGPT2重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H15N2 重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
CEP57重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
人膀胱移行上皮細(xì)胞大鼠細(xì)胞色素P450家族成員11B1(CYP11B1)試劑盒 ,,英文名: CYP11B1 ELISA Kit
Mouse adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 小鼠能a1A受體(ADRA1A)試劑盒
Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSP-70ELISAKit大鼠熱休克蛋白70
細(xì)胞KUNEL測(cè)定試劑盒10次
ELISAKitIL1Ra大鼠白介素1受體拮抗劑
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作