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產(chǎn)品名稱：人膀胱移行上皮細胞

組織來源：膀胱組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

細胞簡介：

人膀胱上皮分離自膀胱組織,；膀胱是一個儲尿器官，在哺乳類動物，它是由平滑肌組成的一個囊形結(jié)構(gòu),，位于骨盆內(nèi),，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,，可以控制尿液的排出,。膀胱壁由三層組織組成，由內(nèi)向外為黏膜層,、肌層和外膜,。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成，稱為逼尿肌,，逼尿肌收縮,，可使膀胱內(nèi)壓升高，壓迫尿液由尿道排出,。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,，形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,，防止尿液自膀胱漏出,。膀胱壁分為三層：即漿膜層（蜂窩脂肪組織）、肌肉層（逼尿肌,、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織）。其主要作用有：①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分,；②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子,；③受損后影響系膜細胞和上皮細胞，進而影響腎臟病變,。

方法簡介：

公司實驗室分離的人膀胱移行上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人膀胱移行上皮經(jīng)Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

兔p物質(zhì)(SP)試劑盒   96T/48T

兔p53(p53)試劑盒   96T/48T

兔C反應(yīng)蛋白（CRP）試劑盒   96T/48T

兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒   96T/48T

小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human motilin (MTL) ELISA Kit 人胃動素(MTL)試劑盒

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISAKit 人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCoicosterone,CO試劑盒人皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織CHK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanProteinPhosphatase,PPELISAKit人蛋酸酶(PP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

細胞色素P450 17A1重組兔單克隆抗體

FITC標記人CD40單克隆抗體

ANGPT2重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

結(jié)蛋白(Des)重組蛋白 Recombinant Desmin (Des)

CEP57重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標簽) Protein

ICOSLG Protein Human 重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白

HA Protein H15N2 重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

結(jié)蛋白(Des)重組蛋白 Recombinant Desmin (Des)

ICOSLG Protein Human 重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白

ANGPT2重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HA Protein H15N2 重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

CEP57重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標簽) Protein

人膀胱移行上皮細胞大鼠細胞色素P450家族成員11B1(CYP11B1)試劑盒 ，英文名： CYP11B1 ELISA Kit

Mouse adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 小鼠能a1A受體(ADRA1A)試劑盒

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHSP-70ELISAKit大鼠熱休克蛋白70

細胞KUNEL測定試劑盒10次

ELISAKitIL1Ra大鼠白介素1受體拮抗劑

收到細胞如何處理？

1,、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

3,、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。

5,、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作