詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
膀胱組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7266 |
細(xì)胞簡介:
人膀胱成纖維分離自膀胱組織,;膀胱是一個(gè)儲尿器官,在哺乳類動(dòng)物,,它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu),,位于骨盆內(nèi),其后端開口與尿道相通,。膀胱與尿道的交界處有括約肌,,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,,由內(nèi)向外為黏膜層,、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,,稱為逼尿肌,,逼尿肌收縮,,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出,。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,,防止尿液自膀胱漏出,。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌,、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),,在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的膀胱成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長,,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細(xì)胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,,研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程,。近年來,堿性成纖維細(xì)胞生長因子在膀胱癌發(fā)病過程中的作用,、與生物學(xué)行為之間的關(guān)系以及治療上的應(yīng)用已受到重視,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人膀胱成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人膀胱成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ai endomysial aibody IgA (EMA IgA) ELISA Kit 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)試劑盒
HumanHemoglobinH,HbHELISAKit 人血紅蛋白H(HbH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42試劑盒96T人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量試劑盒20次
MonkeyCollageypeⅣ,ColⅣELISAKit猴Ⅳ型膠原(ColⅣ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞角蛋白73抗體
FBXL17蛋白抗體
CAMK4重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 Protein
S轉(zhuǎn)移酶μ2(GSTμ2)重組蛋白 Recombinant Glutathione S Transferase Mu 2, Muscle (GSTm2)
PLAC9重組人 PLAC9 / Placenta-specific 9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
DPP10 Protein Human 重組人 DPP10 / DPRP3 蛋白
CD274 Protein Canine 重組狗 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
S轉(zhuǎn)移酶μ2(GSTμ2)重組蛋白 Recombinant Glutathione S Transferase Mu 2, Muscle (GSTm2)
DPP10 Protein Human 重組人 DPP10 / DPRP3 蛋白
CAMK4重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 Protein
CD274 Protein Canine 重組狗 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PLAC9重組人 PLAC9 / Placenta-specific 9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
人膀胱成纖維細(xì)胞大鼠細(xì)胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)試劑盒 ,英文名: CYP1A2 ELISA Kit
Mouse nerve nuition factor 4 (-4) ELISA Kit 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)試劑盒
Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinElisakit 小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSP-70(MouseHeatShockProtein70)ELISAKit小鼠熱休克蛋白70
細(xì)胞KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitIL-23大鼠白介素23