詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人肝外膽管上皮細(xì)胞
組織來源:肝外膽管組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
M199,、FBS,、上皮細(xì)胞生長添加劑、Hydrocortisone,、Insulin,、Transferrin、Epinephrine,、Penicillin,、Streptomycin等
細(xì)胞簡介:
人肝外膽管上皮分離自肝外膽管組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,,并在身體里面起著去氧化,、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,,在右側(cè)橫隔膜之下,,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方,。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,,又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,,肝上面則與膈及腹前壁相接,。臨床上常見的膽管病變?nèi)缒懙篱]鎖、先天性膽總管囊腫,、原發(fā)性硬化性膽管炎等,,都是以膽管上皮細(xì)胞為病變的靶位,引起膽管上皮的損傷。了解正常膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變膽管上皮細(xì)胞的病理生理學(xué)特征對研究膽管病變的發(fā)病機(jī)制,、診斷和治療具有重要意義,。
方法簡介:
見說明
質(zhì)量檢測:
本公司生產(chǎn)的肝外膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,,接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,,通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,;經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠骨鈣素 英文名稱: Osteocalcin 規(guī)格: 英文縮寫: OC
小鼠抑瘤素 英文名稱: M 規(guī)格: 英文縮寫: OSM
小鼠催產(chǎn)素 英文名稱: Oxytocin 規(guī)格: 英文縮寫: OT
小鼠骨保護(hù)素配體 英文名稱: Osteoprotegerin ligand 規(guī)格: 英文縮寫: OPGL
小鼠抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)試劑盒 96T/48T
Human aldosterone (ALD) ELISA Kit 人固酮(ALD)試劑盒
Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit 人胰島淀粉樣多肽(IAPP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAndrogenBindingProtein,ABP試劑盒人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物二酚氧化酶(diphenolase)活性比色法定量試劑盒20次
MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit猴載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒規(guī)格:96T/48T
胃動(dòng)素受體抗體
EMID1蛋白抗體
SERPINB6B重組小鼠 Serpinb6b 蛋白 Protein
白介素12受體β2(IL2Rβ2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 12 Receptor Beta 2 (IL12Rb2)
SAE1重組人 SAE1 蛋白 Protein
DPP10 Protein Human 重組人 DPP10 / DPRP3 蛋白
TNFSF4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)重組蛋白 Recombinant N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase)
DPP10 Protein Human 重組人 DPP10 / DPRP3 蛋白
F9重組小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 蛋白 Protein
TNFRSF21 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TNFRSF21 / DR6 蛋白
PTH重組人 PTH / PTH1 / Parathyroid Hormone 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
人肝外膽管上皮細(xì)胞大鼠細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)試劑盒 ,英文名: ERK2 ELISA Kit
Mouse nerve growth guidance factor Slit2 ELISA Kit 小鼠神經(jīng)生長導(dǎo)向因子Slit2 試劑盒
MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit 小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HSV-IIgG單皰疹Ⅰ型病毒IgG(間接法二步法)
細(xì)胞ITK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-3大鼠白介素3
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作