化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源：腦靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人腦靜脈血管平滑肌分離自腦靜脈組織；與腦動(dòng)脈相比,，腦靜脈管壁較薄,。與身體其他部位的靜脈不同，腦靜脈管壁中沒(méi)有靜脈瓣,，靜脈血的回流依賴高位的勢(shì)能,。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為：大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈；小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢,，進(jìn)入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮,，最后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢,，即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞,，大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腦靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腦靜脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
胃泌素 英文名稱： Gasin 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： G
心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA3 英文名稱： cardiac muscle anscription factor GATA3 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： GATA3
心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 英文名稱： cardiac muscle anscription factor GATA4 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： GATA4
粒細(xì)胞趨化蛋白-2 英文名稱： neuophilicgranulocyte chemokines Protein 2 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： GCP-2
小鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA 試劑盒
Rat urokinase (UK) ELISA Kit 大鼠(UK)試劑盒
HumanHerpessimplexvirusⅠaibody,HSVⅠ-AbELISAKit 人單皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanAspaateaminoansferase,GOT/GPT試劑盒人天門冬轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/GPT)試劑盒
植物源性食品山核桃(pecan)試劑盒20次
Humahymidinephosphorylase,TPELISAKit人核苷0酸化酶(TP)試劑盒
微管相關(guān)蛋白Tau-4單克隆抗體
E3泛素蛋白連接酶亞基KPC2抗體
NCAM1重組大鼠 NCAM1 / CD56 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Cyclin E 周期素E/原癌基因抗原 0.5mgCyclin E 周期素E/原癌基因抗原
MYOC重組人 MYOC / Myocilin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FGF18 Protein Human 重組人 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ICAM1 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Cyclin E 周期素E/原癌基因抗原 0.5mgCyclin E 周期素E/原癌基因抗原
FGF18 Protein Human 重組人 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NCAM1重組大鼠 NCAM1 / CD56 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ICAM1 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MYOC重組人 MYOC / Myocilin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞大鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子2(SOCS2)試劑盒 ，英文名： SOCS2 ELISA Kit
Mouse epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 小鼠上皮粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒
MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒 進(jìn)口分裝
HSV-IIgM單皰疹Ⅰ型病毒IgM(捕獲法一步法)
細(xì)胞IRAK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitLTB4大鼠白三烯B4
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代,；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
化工儀器網(wǎng)