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產(chǎn)品名稱(chēng)：人毛囊干細(xì)胞

組織來(lái)源：毛囊組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次,；

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳3-5代左右；

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人毛囊干分離自皮膚毛囊組織,；毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮,。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭，中心是一根毛發(fā),，立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,，附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表面的開(kāi)口是毛囊孔,。毛囊位于真皮和皮下組織中,，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織,。毛囊干細(xì)胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一種細(xì)胞,。毛囊干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞，在體內(nèi)處于靜止?fàn)顟B(tài),，在體外培養(yǎng)作用下表現(xiàn)出驚人的增殖能力,。研究發(fā)現(xiàn)，毛囊干細(xì)胞具有多向分化潛能,，它可以分化成表皮、毛囊,、皮脂腺,，參與皮膚創(chuàng)傷愈合的過(guò)程。毛囊干細(xì)胞和其它成體干細(xì)胞一樣,，具有慢周期性,、未分化性、自我更新和體外增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn),。毛囊干細(xì)胞分化經(jīng)毛囊干細(xì)胞（hair follicle stem cells,，FSC）、短暫增殖細(xì)胞（transit amplifying cells,，TAC）有絲分裂后分化細(xì)胞（postmitotic differentiating cells,，PDC）三個(gè)階段。毛囊干細(xì)胞在光鏡下呈立方形,，細(xì)胞體積小,，核漿比率大，表面光滑,，皺褶少,，又被稱(chēng)為非鋸齒形細(xì)胞，細(xì)胞體積的增大與增殖能力呈負(fù)相關(guān),。超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞表面有少許微絨毛,，細(xì)胞核存在許多卷曲，染色質(zhì)彌散分布,，這些形態(tài)特征均表現(xiàn)出原始細(xì)胞的特性,。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人毛囊干采用膠原酶-聯(lián)合消化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人毛囊干經(jīng)CK19,、CD200免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠補(bǔ)體片斷3b(C3b)試劑盒   96T/48T

小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒   96T/48T

小鼠補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)試劑盒   96T/48T

小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble cell differeiation aigen 86 (B7-2/sCD86) ELISA Kit 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒

HumanSerumamyloidP,SAPELISAKit 人血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCA試劑盒人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物賴(lài)(lysine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

HumanVitaminC,，VCELISAKit人C(VC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體

CYP1A2單克隆抗體

TNFSF9重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2 1gGHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2) 醋酸促生長(zhǎng)激素釋放肽2

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein

ENTPD2 Protein Human 重組人 NTPDase 2 / ENTPD2 蛋白 (aa 29-460, His 標(biāo)簽)

CD28 Protein Mouse 重組小鼠 CD28 蛋白

GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2 1gGHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2) 醋酸促生長(zhǎng)激素釋放肽2

ENTPD2 Protein Human 重組人 NTPDase 2 / ENTPD2 蛋白 (aa 29-460, His 標(biāo)簽)

TNFSF9重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD28 Protein Mouse 重組小鼠 CD28 蛋白

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein

人毛囊干細(xì)胞大鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)試劑盒 ，英文名： PAI2 ELISA Kit

Mouse lactoferrin / lactoferrin (LF/LTF) ELISA Kit 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒

Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HSV-IIIgM單皰疹Ⅱ型病毒IgM(間接法二步法)

細(xì)胞HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitLIFR大鼠白血病抑制因子受體

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代,；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作