詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
脈絡膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7426 |
細胞簡介:
人脈絡膜微血管內皮分離自眼球脈絡膜組織,;脈絡膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,,含有豐富血管和色素細胞,,對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,,使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,,圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜,,為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,,由纖維組織,、小血管和毛細血管組成,軟而薄,,棕紅色,,在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,續(xù)連于睫狀體后方,。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體,,并有遮光作用,,使反射的物象清楚。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用,,對整個視覺神經(jīng)有調節(jié)作用,。續(xù)連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細胞,,有營養(yǎng)和遮光作用,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的人脈絡膜微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測:
公司實驗室分離的人脈絡膜微血管內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat heat shock protein 20 (HSP-20) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒
Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISAKit 人葡萄糖激酶調節(jié)蛋白(GKRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanC-typenaiureticpeptide,CNP試劑盒人C型尿肽(CNP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織質膜(plasmamembrane)分離試劑盒20次
Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit人可溶性壞死因子相關凋亡誘導配體(sAIL)試劑盒規(guī)格:96T/48T
鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體
CD99抗體
ROR1重組人 ROR1 蛋白 (aa 453-783, His & GST 標簽) Protein
solute carrier family 1 溶質攜帶物家族-1(抗原 0.5mgsolute carrier family 1 溶質攜帶物家族-1(抗原)
SPP1重組人 Osteopontin / SPP1 / ETA-1 蛋白 Protein
GALNT10 Protein Human 重組人 GALNT10 / GalNAc-T10 蛋白
PDCD1LG2 Protein Human 重組人 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His & Fc 標簽)
solute carrier family 1 溶質攜帶物家族-1(抗原 0.5mgsolute carrier family 1 溶質攜帶物家族-1(抗原)
GALNT10 Protein Human 重組人 GALNT10 / GalNAc-T10 蛋白
ROR1重組人 ROR1 蛋白 (aa 453-783, His & GST 標簽) Protein
PDCD1LG2 Protein Human 重組人 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His & Fc 標簽)
SPP1重組人 Osteopontin / SPP1 / ETA-1 蛋白 Protein
人脈絡膜微血管內皮細胞大鼠纖維蛋白肽B(FPB)試劑盒 ,,英文名: FPB ELISA Kit
Mouse chorionic gonadoopin (CG) ELISA Kit 小鼠絨毛膜(CG)試劑盒
Mousemaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 小鼠基質金屬蛋白酶5(MMP-5)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHuman2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit人2,3Dinor血栓烷B2
細胞HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitEGF大鼠表皮生長因子