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產(chǎn)品名稱：人卵巢微血管內(nèi)皮細胞

組織來源：卵巢組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細胞簡介：

人卵巢微血管內(nèi)皮分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官,，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素,。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發(fā)育（右側已退化）,，呈葡萄狀,，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色,，卵巢表面密布血管,。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,，而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,，它的外表有一層上皮組織,，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內(nèi)部結構可分為皮質和髓質,。皮質位于卵巢的周圍部分,，主要由卵泡和結締組織構成；髓質位于中央,，由疏松結締組織構成,，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng),。微血管又稱毛細血管,。分布于各種組織和細胞間的最微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間,。平均直徑7～9微米,，數(shù)量極多，成網(wǎng)狀分布,。管壁由一層內(nèi)皮細胞及一薄層基膜組成,，厚約0.5微米?；ね饷嬗斜咏Y締組織,，其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等,。最細的微血管由一個內(nèi)皮細胞圍成管腔，較粗的微血管由2～3個內(nèi)皮細胞圍成,。分布于肌肉組織,、神經(jīng)組織和結締組織中的微血管，內(nèi)皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃）,，稱連續(xù)微血管,。血管內(nèi)皮細胞在器官和組織的結構和功能上起著非常重要的作用,。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關。近年來血管內(nèi)皮細胞在炎癥,、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視,。研究發(fā)現(xiàn)，不同來源的內(nèi)皮細胞在生物學特征,、結構和功能等方面均存在一定差別,，而同是微血管內(nèi)皮細胞，它們又存在器官和組織的特異性,。

方法簡介：

公司實驗室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法,、最后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。

二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）,、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

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小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA 試劑盒

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HumaumormarkerDR-70forlungcancer,DR-70TMELISAKit人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)試劑盒

羰基還原酶1抗體

CD244抗體

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Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35 1mgAmyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉樣肽25-35(多肽)

AMPK重組人 AMPK (G1/B2/A2) Heterotrimer 蛋白 Protein

FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標簽)

CD40 Protein Rat 重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白

半乳糖凝集素1(GAL1)重組蛋白 Recombinant Galectin 1 (GAL1)

FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標簽)

NAALADL1重組小鼠 NAALADL1 蛋白 (His 標簽) Protein

FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (His 標簽)

ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977) Protein

人卵巢微血管內(nèi)皮細胞大鼠纖維介素蛋白(FGL2)試劑盒 ,，英文名： FGL2 ELISA Kit

Mouse heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)試劑盒

MouseSolubleIercellularAdhesionMolecule1,sICAM-1ELISAKit 小鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHumanAgoiRelatedProtein,AGRPELISAKit人Agoi相關蛋白

細胞HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKitCFH大鼠補體因子H

收到細胞如何處理？

1,、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

3,、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài),、所用基礎培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。

5,、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時，若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作