詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
血管組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7653 |
細(xì)胞簡介:
人淋巴血管內(nèi)皮分離自淋巴管組織;淋巴管由毛細(xì)淋巴管匯合而成,。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,,但管徑較細(xì),管壁較薄,,瓣膜較多且發(fā)達(dá),,外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺,、深二種,。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,,收集皮膚和皮下組織的淋巴,。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴,。淺,、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,,通常經(jīng)過一個或多個淋巴結(jié),,從而把淋巴細(xì)胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。當(dāng)局部感染時,,細(xì)菌,、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大,。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,,則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞(LEC)是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮,,是構(gòu)成淋巴管壁的主要結(jié)構(gòu),,參與維持體液平衡,,調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞再循環(huán)和機(jī)體的免疫反應(yīng)和組織液及蛋白質(zhì)的運輸,在疾病過程中也起著重要作用,。近年研究表明,,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴(kuò)散等病理過程中起重要作用,,而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能:①調(diào)節(jié)體液,、蛋白和組織壓力平衡,;②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤,;②淋巴管炎,;③淋巴結(jié)核。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的人淋巴血管內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人淋巴血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板生成素(TPO)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板活化因子(PAF)試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒
HumanLeucineaminopepridase,LAPELISAKit 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CamelEndothelin1,ET-1試劑盒內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
魚類組織砷元素比色法定量試劑盒20次
MouseInhibin,INH-AELISAKit小鼠抑制素A(INH-A)試劑盒規(guī)格:96T/48T
絲蛋白酶1抗體
APC標(biāo)記小鼠CD45.2單克隆抗體
FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
Isulin 胰島素(抗原 0.5mgIsulin 胰島素(抗原)
FAM3D重組人 FAM3D 蛋白 Protein
CD58 Protein Human 重組人 LFA-3 / CD58 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NAALADL1 Protein Mouse 重組小鼠 NAALADL1 蛋白
Isulin 胰島素(抗原 0.5mgIsulin 胰島素(抗原)
CD58 Protein Human 重組人 LFA-3 / CD58 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
NAALADL1 Protein Mouse 重組小鼠 NAALADL1 蛋白
FAM3D重組人 FAM3D 蛋白 Protein
人淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)試劑盒 ,,英文名: UCP2 ELISA Kit
Pla vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 植物3(VD3)試劑盒
MouseImmunoglobulinG,IgGELISAKit 小鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanALRELISAKit人肝再生增強(qiáng)因子
細(xì)胞HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitVLA大鼠遲現(xiàn)抗原