人角膜內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：Leishmanolysin樣肽酶抗體 FAM57B蛋白抗體 PRELP蛋白抗體 人口腔上皮細(xì)胞 兔腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 WiDr人結(jié)腸癌細(xì)胞 SU-DHL-4（人B淋巴瘤細(xì)胞）

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產(chǎn)品名稱(chēng)：人角膜內(nèi)皮細(xì)胞

組織來(lái)源：眼角膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人角膜內(nèi)皮分離自眼角膜組織,；角膜位于眼球前壁的一層透明膜,，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形,，從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄,。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,，如有外物接觸角膜,，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛,。為了保持透明，角膜并沒(méi)有血管,，透過(guò)外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層,、前彈力層、基質(zhì)層,、后彈力層,、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜的高度透明性和光學(xué)性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一,，而角膜內(nèi)皮細(xì)胞（CEC）在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用,。角膜內(nèi)皮細(xì)胞是角膜內(nèi)層的單層細(xì)胞，構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障,，通過(guò)離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分,，維持角膜的半脫水狀態(tài)，保證角膜的正常厚度和透明度,。一旦角膜內(nèi)皮細(xì)胞功能出現(xiàn)紊亂,，常導(dǎo)致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有：①角膜是的無(wú)血管的組織,，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,；②角膜內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)角膜透明性有重要作用；③角膜內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)Na+-K+-ATP酶活性，維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度,，防止水分滲入角膜內(nèi),，維持角膜實(shí)質(zhì)層相對(duì)脫水狀態(tài)，維持透明性,。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜內(nèi)皮采用混合膠原酶消化結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜內(nèi)皮經(jīng)NSE（神經(jīng)元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。

4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代,；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠血栓前體蛋白   英文名稱(chēng)：   Mouse Thrombus Precursor Protein   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TpP

小鼠促甲狀腺素   英文名稱(chēng)：   Mouse Thyroid Stimulating Hormone   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TSH

小鼠甲狀腺素   英文名稱(chēng)：   Mouse Thyroxine   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   T4

小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體   英文名稱(chēng)：   Mouse TNF-related apoptosis inducing ligand   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   AIL

小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat hepatocyte growth factor (HGF) ELISA Kit 大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)試劑盒

Humansphingomyelin,SMELISAKit 人鞘0脂(SM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1試劑盒雞巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞ANDROGEECEPTOR蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousehiston-H2bELISAKit小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒規(guī)格：96T/48T

神經(jīng)細(xì)胞粘附分子2抗體

9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框171抗體

ERAP2重組人 LRAP / ERAP2 蛋白 Protein

血紅素氧合酶1(HO1)重組蛋白 Recombinant Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

CD7 Protein Human 重組人 CD7 蛋白

GP120 Protein HIV 重組人類(lèi)免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)

血紅素氧合酶1(HO1)重組蛋白 Recombinant Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)

CD7 Protein Human 重組人 CD7 蛋白

ERAP2重組人 LRAP / ERAP2 蛋白 Protein

GP120 Protein HIV 重組人類(lèi)免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

人角膜內(nèi)皮細(xì)胞大鼠信號(hào)素3A(SEMA3A)試劑盒 ,，英文名： SEMA3A ELISA Kit

Pla calmodulin (CAM) ELISA Kit 植物鈣調(diào)素(CAM)試劑盒

Mouseoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanai-PL7-aibodyELISAKit人PL7抗體/抗蘇氨酰NA合成酶

細(xì)胞FGFR3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitGHR-Ab大鼠釋放激素受體抗體