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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：人角膜基質(zhì)細(xì)胞
組織來(lái)源：眼角膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人角膜基質(zhì)分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6,，從后面看角膜呈正圓形,，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,，中央部最薄,。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜,，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛,。為了保持透明，角膜并沒有血管,，透過(guò)外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層,、前彈力層、基質(zhì)層,、后彈力層,、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,，占據(jù)角膜厚度的90%,，由角膜基質(zhì)細(xì)胞、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成,。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成,。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整，透明度高的特點(diǎn),，正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分,，維持角膜的透明度，此細(xì)胞對(duì)于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義,。角膜基質(zhì)細(xì)胞,，存在于角膜基質(zhì)層中，在正常情況下,，處于靜止?fàn)顟B(tài),。但當(dāng)角膜損傷時(shí)，不同上皮來(lái)源的因子及環(huán)境信號(hào),，將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng),，決定著角膜能否被修復(fù)。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜基質(zhì)采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human somatostatin (SS) ELISA Kit 人(SS)試劑盒
HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit 人胰多肽(PP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-Sa-aibody試劑盒人抗Sa抗體(ai-Sa-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物細(xì)胞周期G2期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
HumaU3AProteinELISAKit人TU3A蛋白(TU3A)試劑盒規(guī)格：96T/48T
神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白2抗體
7號(hào)染色體開放閱讀框65抗體
IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
Juxtanodin蛋白(JN)重組蛋白 Recombinant Juxtanodin (JN)
CNPY4重組人 CNPY4 蛋白 Protein
FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
HAVCR1 Protein Rat 重組大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
Juxtanodin蛋白(JN)重組蛋白 Recombinant Juxtanodin (JN)
FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
HAVCR1 Protein Rat 重組大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CNPY4重組人 CNPY4 蛋白 Protein
人角膜基質(zhì)細(xì)胞大鼠性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)試劑盒 ，英文名： SOX2 ELISA Kit
Mouse heat shock protein 40 (Hsp-40) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)試劑盒
MouseprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanai-Sa-aibodyELISAKit人抗Sa抗體
細(xì)胞FGFR1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPRL大鼠催乳素
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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