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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：人呼吸道上皮細(xì)胞
組織來(lái)源：呼吸道
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人呼吸道上皮分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時(shí)氣流所經(jīng)過的通道,，有肺脊椎動(dòng)物的呼吸道分上,、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道,。氣管及其以后一分再分的管道,，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹,。氣管樹是隨著動(dòng)物的進(jìn)化逐漸復(fù)雜化的,。整個(gè)呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外）,，它能溫暖（或冷卻）,、濕潤(rùn)和凈化吸入的空氣，對(duì)于呼吸器官和機(jī)體有著保護(hù)作用,。呼吸道以骨或軟骨做支架,，其內(nèi)表面覆蓋著黏膜，黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細(xì)血管,。呼吸道上皮細(xì)胞屬于假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮,，分布于呼吸道的內(nèi)表面，主要由柱狀,，杯形,，梭形和錐形等不同形狀細(xì)胞組成,?？瓷先ハ駨?fù)層上皮，但實(shí)際上所有細(xì)胞底部均附于基膜上,，屬單層上皮,，故稱假?gòu)?fù)層柱狀上皮,，上皮表面有纖毛，杯狀細(xì)胞可分泌粘液,，包裹著大量細(xì)菌,，借助纖毛不斷擺動(dòng)將其慢慢移動(dòng)至出消化道。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人呼吸道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠紅細(xì)胞生成素受體(mouse EPOR) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(mouse ECP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽-78(mouse ENA-78) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠血管內(nèi)皮抑素(mouse Endostatin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)試劑盒
Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 人糖化蛋白(GSP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAlpha-fetoprotein,AFP試劑盒人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
乳酸菌S-層蛋白抗體
1號(hào)染色體開放閱讀框190抗體
LEPR重組人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
糖原合酶激酶3α(GSK3α)重組蛋白 Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)
CNPY3重組人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
DLL4 Protein Human 重組人 DLL4 / Delta4 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
糖原合酶激酶3α(GSK3α)重組蛋白 Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)
DLL4 Protein Human 重組人 DLL4 / Delta4 蛋白
LEPR重組人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
CNPY3重組人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
人呼吸道上皮細(xì)胞大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGFC)試劑盒 ,，英文名： VEGFC ELISA Kit
Mouse noradrenaline (NA) ELISA Kit 小鼠去甲(NA)試劑盒
Mousemonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit人殺菌性/通透性增加蛋白
細(xì)胞EPHA1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPP大鼠蛋酸酶
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