詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱(chēng):人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源:冠狀動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮分離自冠狀動(dòng)脈組織,;冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,,起于主動(dòng)脈根部,分左右兩支,,行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類(lèi)原則,將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型:右優(yōu)勢(shì)型,、均衡型,、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的對(duì)分支,。左冠狀動(dòng)脈為一短干,,發(fā)自左主動(dòng)脈竇,經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間,,沿冠狀溝向左前方行后,,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,,旋支繞過(guò)心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合,。冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布,是一薄層的專(zhuān)門(mén)上皮細(xì)胞,,它形成冠狀動(dòng)脈的內(nèi)壁,,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng),,由心臟直至最小的微血管,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠上腺素(EPI)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠核因子kb(NF-kb)試劑盒 96T/48T
Rat ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒
humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKIT 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAi-OvaryAibody,AOAb試劑盒人抗卵巢抗體(AOAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物高效液相色譜法定量試劑盒20次
Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
溶質(zhì)載體家族25成員35抗體
16號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框41抗體
CLEC10A重組小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
VGF神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)重組蛋白 Recombinant VGF Nerve Growth Factor Inducible (VGF)
SMPDL3A重組人 SMPDL3A 蛋白 Protein
FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白
IFNG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Interferon Gamma 蛋白
C-型凝集素域家族11成員A(CLEC11A)重組蛋白 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)
FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白
DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 Protein
FCGR3A Protein Rat 重組大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白
BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 Protein
人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR3)試劑盒 ,英文名: VEGFR3 ELISA Kit
Mouse hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 小鼠輕化1(HYD)試劑盒
Mousemaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanBetacatenin,Beta-CatELISAKit人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白
細(xì)胞D-乳酸比色法定量試劑盒20次
ELISAKiesistin大鼠抵抗素
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代;若未超過(guò)80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作