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本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱(chēng)：人骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞
組織來(lái)源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代；不建議多次傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖分離自骨髓,；骨髓是機(jī)體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞,、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細(xì)菌,、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體,。因此,，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長(zhǎng)骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,，稱(chēng)為紅骨髓。出生時(shí),，紅骨髓充滿(mǎn)全身骨髓腔,，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多,，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,，亦稱(chēng)為成血管細(xì)胞（Angioblast）,，是一群具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù),。研究顯示,，內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病,、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路，EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn),。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖采用沖洗骨髓,、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代,；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒 96T/48T
小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒 96T/48T
小鼠抗受體(A)試劑盒 96T/48T
小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒 96T/48T
小鼠腦脊髓病毒(TMEV)試劑盒 96T/48T
Skin reactive factor / inflammatory factor (SRF/IF) ELISA Kit 人皮膚反應(yīng)因子/性因子(SRF/IF)試劑盒
Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAA試劑盒人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌NADPH氧化酶活性比色法定量試劑盒20次(10樣本)
MouseAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人類(lèi)乳頭狀瘤病毒16抗體
組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶GCN5抗體
HSPB1重組人 HSP27 / HSPB1 蛋白 Protein
腎素(REN)重組蛋白 Recombinant Renin (REN)
MAPK14重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (Activated in vitro, His 標(biāo)簽) Protein
CTHRC1 Protein Human 重組人 CTHRC1 蛋白
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
腎素(REN)重組蛋白 Recombinant Renin (REN)
CTHRC1 Protein Human 重組人 CTHRC1 蛋白
HSPB1重組人 HSP27 / HSPB1 蛋白 Protein
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
MAPK14重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (Activated in vitro, His 標(biāo)簽) Protein
人骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞大鼠血管生成素2(ANGPT2)試劑盒 ，英文名： ANGPT2 ELISA Kit
Mouse prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 小鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒
Mousemaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase,MMP-8ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanBeta-glucosidaseELISAKit人β葡糖苷酶
細(xì)胞DYRK1A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitFASL大鼠凋亡相關(guān)因子配體
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