詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:人肝動脈平滑肌細(xì)胞
組織來源:肝動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞簡介:
人肝動脈平滑肌分離自肝動脈組織;在胚胎期,,肝臟有3條動脈供血,,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,,這3條動脈分別的不同部位,。出生后,一般保留一條動脈,,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左,、右肝動脈供應(yīng)左,、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈,。但也有2條動脈并存的情況,,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),,而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見,。此外,還有5%像胚胎期一樣,,3條動脈同時存在,。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,,如果在常見肝動脈類型外,,還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈,。肝動脈平滑肌細(xì)胞是肝動脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。肝動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關(guān)鍵因素,,最新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應(yīng),,并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。
方法簡介:
公司實驗室分離的人肝動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人肝動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISAKit ELISA.
兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISAKit ELISA.
兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit ELISA.
兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISAKit ELISA.
小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒
Rat fractalkine (FK) ELISA Kit 大鼠趨化因子(FK)試劑盒
Humanfocaladhesionkinase,FAKELISAKit 人黏著斑激酶(FAK)試劑盒 進口分裝
Humanbrainnaiureticpeptide,BNP試劑盒人腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒
植物組織膜性囊泡(vacuole)分離試劑盒20次
HumanSquamousCellCarcinomaAigen2,SCCAg2ELISAKit人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)試劑盒
核苷酸結(jié)合蛋白3樣蛋白抗體
腫瘤抑制基因抗體
CD83重組食蟹猴 CD83 蛋白 Protein
MAGE-1 黑色素瘤相關(guān) 0.5mgMAGE-1 黑色素瘤相關(guān)
IL21重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 Protein
GABARAPL2 Protein Human 重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ITK Protein Mouse 重組小鼠 ITK Kinase 蛋白 (aa 351-619, His & GST 標(biāo)簽)
MAGE-1 黑色素瘤相關(guān) 0.5mgMAGE-1 黑色素瘤相關(guān)
GABARAPL2 Protein Human 重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD83重組食蟹猴 CD83 蛋白 Protein
ITK Protein Mouse 重組小鼠 ITK Kinase 蛋白 (aa 351-619, His & GST 標(biāo)簽)
IL21重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 Protein
人肝動脈平滑肌細(xì)胞大鼠血小板因子4(PF4)試劑盒 ,,英文名: PF4 ELISA Kit
Mouse coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit 小鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)試劑盒
Mousebasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9ELISAKit 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(bFGF-9)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHumanCollagenaseIELISAKit人膠原酶I
細(xì)胞CDK2/CYCLINE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitHGF大鼠肝細(xì)胞生長因子