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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：人腹膜間皮細(xì)胞
組織來源：腹膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人腹膜間皮分離自腹膜組織；腹膜是存在于高等脊椎動(dòng)物腹腔中的一層黏膜,，主要由間皮細(xì)胞構(gòu)成,，藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,，能分泌黏液潤(rùn)濕臟器的表面,，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液,、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連,；腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果。腹膜（peritoneum）為全身面積,、配布最復(fù)雜的漿膜,，由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成，薄而光滑,，呈半透明狀,。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層,；覆蓋腹,、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層,。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,，共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是臟,、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙,。腹膜腔內(nèi)有少量漿液，在臟器活動(dòng)時(shí)可減少摩擦,。腹膜間皮細(xì)胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,，是覆蓋于腹膜表面的一層細(xì)胞。間皮細(xì)胞是構(gòu)成間皮的細(xì)胞,，正常大小約為15-25微米,，細(xì)胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤(rùn)滑,，使器官與器官,、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護(hù)，不會(huì)互相磨損受傷,。而間皮所生產(chǎn)的潤(rùn)滑和保護(hù)作用就是靠間皮細(xì)胞所分泌的物質(zhì)來達(dá)成,，分泌物多半為細(xì)胞外基質(zhì)、玻尿酸類物質(zhì),。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腹膜間皮采用混合膠原酶消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腹膜間皮經(jīng)PCK,、Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬低分子肝素(LMWH)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬蛋白激酶A(PKA)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬肌球蛋白輕鏈0酸酶(MLCP)ELISA 試劑盒
Neuroophic factor glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒
Porcineacetylcholine,ACHELISAKit 豬乙酰(ACh)試劑盒 進(jìn)口分裝
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血液離子(K)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次
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致死因子惡性腦瘤樣蛋白4抗體
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LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein
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CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase 0.5mgCNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase) C型尿肽抗原
ANXA5 Protein Human 重組人 ANXA5 / Annexin Ⅴ / Annexin A5 蛋白
ACVRL1重組小鼠 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
IL13RA2 Protein Mouse 重組小鼠 IL13RA2 / CD213A2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein
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腦膜奈瑟菌C群(NM-C)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMouselymphocytefactorELISAKit小鼠淋巴細(xì)胞因子
體液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次
ELISAKit2,3-DPG人2,3-二0酸甘油酸
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