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產(chǎn)品名稱:人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞
組織來源:肺動(dòng)脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡介:
人肺動(dòng)脈成纖維分離自肺動(dòng)脈組織,;肺動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈,。肺大動(dòng)脈起于右心室,在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,,在主動(dòng)脈弓下方分為左,、右肺動(dòng)脈,經(jīng)肺門入肺,。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi),,為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室,,在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行,,至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈,。左肺動(dòng)脈較短,,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上,、下葉,。右肺動(dòng)脈較長而粗,經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行,,至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上,、中、下葉,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持肺動(dòng)脈的正常形態(tài),;合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì),;組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺動(dòng)脈成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺動(dòng)脈成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子巨噬細(xì)胞性蛋白1α試劑盒 兔子巨噬細(xì)胞性蛋白1α試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子巨噬細(xì)胞性蛋白1α試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子巨噬細(xì)胞性蛋白1α試劑盒,、兔子巨噬細(xì)胞性蛋白1α 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體試劑盒 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體試劑盒,、兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒 兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒,、兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1試劑盒 兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1試劑盒、兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat chorionic gonadoopin beta (-CG beta) ELISA Kit 大鼠絨毛膜β(β-CG)試劑盒
HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit 人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCarcinoembryonicFerritin,CEF試劑盒人癌胚鐵蛋白(CEF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組腺病毒效價(jià)溶斑測定試劑盒20次
HumanSolubleClusterofdiffereiation40ligand,,sCD40LELISAKit人可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒規(guī)格:96T/48T
棉鈴蟲紫外波長敏感的視蛋白抗體
真核翻譯起始因子3H抗體
GP120重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group P, strain RBF168) Protein
TGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長因子β受體2(多肽抗原 0.5mgTGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長因子β受體2(多肽抗原)
ANGPTL5重組人 ANGPTL5 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
GHRH Protein Human 重組人 GHRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CEACAM6 Protein Human 重組人 CEACAM6 / CD66c 蛋白
TGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長因子β受體2(多肽抗原 0.5mgTGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長因子β受體2(多肽抗原)
GHRH Protein Human 重組人 GHRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GP120重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group P, strain RBF168) Protein
CEACAM6 Protein Human 重組人 CEACAM6 / CD66c 蛋白
ANGPTL5重組人 ANGPTL5 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞大鼠胰島素樣生長因子1受體(IGF1R)試劑盒 ,,英文名: IGF1R ELISA Kit
Mouse brain naiuretic peptide / brain naiuretic peptide (BNP) ELISA Kit 小鼠腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒
MouseIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit 小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanC-PeptideELISAKit人C肽
細(xì)胞a-染色試劑盒50次
ELISAKitBMPR-Ⅱ大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作