詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞
組織來源:肺靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
人肺大靜脈平滑肌分離自肺大靜脈組織,;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動(dòng)物中,,把動(dòng)脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個(gè)靜脈里流動(dòng)脈血的血管,。左右1對,,共4條,兩條連接右肺,,兩條連接左肺,。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位,。肺靜脈淤血性肺動(dòng)脈高壓,,是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動(dòng)脈高壓。正常情況下,,肺循環(huán)具有血壓低,、阻力小和順應(yīng)性大的特點(diǎn),肺動(dòng)脈壓力高低取決于單位時(shí)間內(nèi)肺動(dòng)脈血流量和肺血管的阻力,,要維持肺循環(huán)的低壓,、低阻的狀態(tài),,必須保證整個(gè)肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,血液順利地由肺動(dòng)脈經(jīng)毛細(xì)血管進(jìn)入肺靜脈,,再入左心室,,經(jīng)過左心室收縮進(jìn)入體循環(huán),才能避免肺動(dòng)脈內(nèi)壓力升高,。肺大靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。該細(xì)胞參與血管壁炎癥反應(yīng),,保持靜脈管腔的通暢,還是多數(shù)動(dòng)脈疾病的靶細(xì)胞,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺大靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺大靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human asialoglyco protein receptor (ASGPR) ELISA Kit 人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)試劑盒
HumanHemoglobinC,HbCELISAKit 人血紅蛋白C(HbC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40試劑盒人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物(AMYLASE)總活性熒光定量試劑盒20次
MonkeyHyaluronicacid,HAELISAKit猴透明質(zhì)酸(HA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域47抗體
長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL6抗體
TSPAN7重組食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IL-23R(Interleukin-23 receptor 0.5mgIL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原
PKM重組人 PKM2 / OIP3 蛋白 Protein
DPEP2 Protein Human 重組人 DPEP2 / MBD-2 蛋白
CD59A Protein Mouse 重組小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL-23R(Interleukin-23 receptor 0.5mgIL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原
DPEP2 Protein Human 重組人 DPEP2 / MBD-2 蛋白
TSPAN7重組食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD59A Protein Mouse 重組小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PKM重組人 PKM2 / OIP3 蛋白 Protein
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞大鼠胰島素樣生長因子2(IGF2)試劑盒 ,,英文名: IGF2 ELISA Kit
Mouse Neuroglobin (NGB) ELISA Kit 小鼠腦紅蛋白(NGB)試劑盒
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3ELISAkit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanC-Polypeptide,CPELISAKit人C多肽
細(xì)胞a-(a-AMYLASE)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitOT/BGP大鼠骨鈣素/骨谷蛋白
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作