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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
肺動(dòng)脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7005 |
細(xì)胞簡介：
人肺大動(dòng)脈平滑肌分離自肺大動(dòng)脈組織,；肺大動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈,。肺大動(dòng)脈起于右心室，在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,，在主動(dòng)脈弓下方分為左,、右肺動(dòng)脈，經(jīng)肺門入肺,。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi),，為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室,，在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行,，至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈,。左肺動(dòng)脈較短,，在左主支氣管前方橫行，分二支進(jìn)入左肺上,、下葉,。右肺動(dòng)脈較長而粗，經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行,，至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上,、中,、下葉。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,，在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用,。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動(dòng)脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵,。研究表明，急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓,，即缺氧性肺動(dòng)脈高壓,，推斷缺氧可能是通過促進(jìn)肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生發(fā)展。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞主要功能：①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應(yīng),；②是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞,。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動(dòng)脈高壓；②先天性肺動(dòng)脈狹窄,；③肺動(dòng)脈栓塞,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4,、長期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長,；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺大動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺大動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒 96T/48T
小鼠結(jié)合蛋白(RBP)試劑盒 96T/48T
小鼠生長因子(GH)試劑盒 96T/48T
小鼠(SS)試劑盒 96T/48T
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)試劑盒 96T/48T
Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)試劑盒
Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神經(jīng)酶(NA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2試劑盒鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞樣品蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
鹵酸脫鹵酶樣水解酶域內(nèi)含蛋白1A抗體
早期發(fā)育調(diào)控蛋白1/EDR1抗體
IL20RB重組大鼠 IL20RB 蛋白 Protein
GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7 0.5mgGPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 0脂酰基醇蛋白聚糖-3(多肽)
CD28重組人 CD28 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein
CLEC10A Protein Human 重組人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
EPHB1 Protein Mouse 重組小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7 0.5mgGPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 0脂酰基醇蛋白聚糖-3(多肽)
CLEC10A Protein Human 重組人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL20RB重組大鼠 IL20RB 蛋白 Protein
EPHB1 Protein Mouse 重組小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CD28重組人 CD28 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)試劑盒 ,，英文名： IGFBP3 ELISA Kit
Mouse visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白
細(xì)胞AX1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitALP-B大鼠骨特異性堿性0酸酶B
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