詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人成骨細胞
組織來源:顱骨組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞簡介:
人成骨分離自顱骨組織;顱骨位于脊柱上方,,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),,起著保護和支持腦,、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分,。腦顱位于顱的后上部,,內(nèi)有顱腔,容納腦,,共8塊,。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔,、口腔等結(jié)構(gòu),,構(gòu)成面部的支架,共15塊,。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,,負責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化,。骨不斷地進行著重建,,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區(qū)域,分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),,分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),,形成骨吸收陷窩;其后,,成骨細胞移行至被吸收部位,,分泌骨基質(zhì),骨基質(zhì)礦化而形成新骨,;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細胞學(xué)基礎(chǔ),,也是藥物篩選,、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
方法簡介:
公司實驗室分離的人成骨采用先用短時間消化,、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人成骨經(jīng)ALP染色檢測,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
脫氧膽酸 10g
DeoxycholicAcid,SodiumSalt 50g
焦碳酸二乙脂 10ml
DEPC 100ml
小鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat coagulation factor III (F III) ELISA Kit 大鼠Ⅲ(FⅢ)試劑盒
Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKit 人脂蛋白α(Lp-α)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBcellgrowthprotein,BCGF試劑盒人B細胞生長因子(BCGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性飼料玉米試劑盒20次
Humahioredoxin,xELISAKit人硫氧化還原蛋白(x)試劑盒規(guī)格:96T/48T
磷酸化胰島素受體抗體
異質(zhì)核糖核蛋白L抗體
BLMH重組小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 Protein
AEG-1 peptide AEG-1抗原 0.5mgAEG-1 peptide AEG-1抗原
FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein
FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白
CHODL Protein Rat 重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (Fc 標簽)
補體成分4a(C4a)重組蛋白 Recombinant Complement Component 4a (C4a)
FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白
ART4重組小鼠 ART4 / CD297 蛋白 Protein
TEK Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Tie2 / TEK 蛋白 (Fc 標簽)
COX5B重組人 COX5B 蛋白 Protein
人成骨細胞大鼠胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)試劑盒 ,,英文名: REG4 ELISA Kit
Mouse endocrine gland vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) ELISA Kit 小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)試劑盒
MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumancytovillin/ezrin,CVLELISAKit人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白
細胞ARG/ABL2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitC4a大鼠過敏毒素/補體片斷4a
收到細胞如何處理?
1,、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作