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產(chǎn)品名稱：人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

組織來源：皮膚組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細(xì)胞簡介：

人表皮角質(zhì)形成分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層,，由胚胎時期外胚層形成,，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層，即基底層,、棘層,、顆粒層、透明層和角質(zhì)層,。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞,，此類細(xì)胞為表皮的主體，由表皮深層始逐漸增殖,、分化,，并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中，細(xì)胞核與細(xì)胞器消失,，細(xì)胞亦失去生理功能而脫落,。未脫落部分對機(jī)體尚有保護(hù)作用，故不必在洗擦身體時用力搓擦,，使其過早脫失,。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后,，細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮,。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化，不能充分增殖,。角質(zhì)形成細(xì)胞最終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,，在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過程中，一般可以分為四層,，即基底層,、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層,。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層,。此外，在某些部位,，特別在掌跖部位,，角質(zhì)層下方還可見到透明層,。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角質(zhì)形成經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

血紅蛋白檢測    (Mg) test case (machine, manual)

產(chǎn)品名稱   Serum low-density lipoprotein (LDL) test kit

甘油三酯（TG酶法）測試盒   Serum high-density lipoprotein (HDL) test kit

總（CHO酶法）測試盒   Glucose (Glu) test case

小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai cenomere aibody (ACA/CENP) ELISA Kit 人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)試劑盒

HumanLysozyme,LZMELISAKit 人(LZM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor8-OHdG(Humanhydroxylysine)ELISAKit人8羥基脫氧鳥苷

乙酰酯酶活性比色法定量試劑盒50次

Mousemyelinbasicprotein,MBPELISAKit小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

磷酸化雙微體2癌基因抗體

胰島素樣生長因子I受體抗體

HA重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PAR-2 (Protease-activated receptors-2 0.5mgPAR-2 (Protease-activated receptors-2) 蛋白酶激活受體-2抗原

SUV420H2重組人 SUV420H2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CCL20 Protein Human 重組人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白

AZU1 Protein Human 重組人 AZU1 / Azurocidin 1 / CAP37 蛋白

PAR-2 (Protease-activated receptors-2 0.5mgPAR-2 (Protease-activated receptors-2) 蛋白酶激活受體-2抗原

CCL20 Protein Human 重組人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白

HA重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

AZU1 Protein Human 重組人 AZU1 / Azurocidin 1 / CAP37 蛋白

SUV420H2重組人 SUV420H2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞大鼠乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)試劑盒 ，英文名： ChAT ELISA Kit

Porcine platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 豬血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒

ELISA 小鼠Active Caspase-8  進(jìn)口分裝

CLIAKitforLPA(MouseL-phenylalanine)ELISAKit小鼠苯

通用型1毫升1厘米光徑石英比色皿1個

ELISAKitEGF雞表皮生長因子